蛋白质在透析的过程中为什么会出现沉淀
：答：如果楼主透析样品中出现太多的沉淀，甚至于跑胶中基本没有带了，那么建议楼主换一种透析液来用，如用TGE也就是传说中的万金油来试试，我一直用的是这种透析液，效果很不错。TGE配法如下：50mM Tris 0.5mM EDTA 50mM Nacl 5%或10％甘油 如果有条件加入1％的甘氨酸或精氨酸和谷胱甘肽会更好些。

超声波能破碎DNA吗?
：答：我想请教的问题是：一 如何判断是不是形成包涵体，我们实验室那个破超声波破碎仪坏了，再没有超声波破碎仪的情况下如何破碎菌体，我配了下面二种裂解液 裂解液的成分：50mMTris-HCl, pH8.0, 2mM EDTA，100mM NaCl，加溶菌酶至100ug/ml，0.1%Triton X-100 裂解液：50mM Tris-HCl(pH8.5~9....

细胞爬片免疫荧光实验有人做过吗?
：答：每次5min；6.1%BSA封闭30min；7.加入1%BSA稀释的一抗，于37℃杂交2h；8.PBS漂洗2次，每次5min；9.加入1%BSA稀释的二抗，于37℃杂交1h；10.PBS漂洗2次，每次5min；11.5ug/ml DAPI染色2min；12.抗淬灭封片剂封片。抗淬灭封片剂:2.5% DABCO (w/v)50mM Tris(pH8.0)90%甘油 ...

蛋白酶k的简介
：答：蛋白酶K的一般工作浓度是50—100μg/ml。在较广的pH范围内（pH 4-12.5）均有活性。推荐反应缓冲液：50mMTris-HCl(pH7.5),10mM CaCl2 。蛋白酶K配制标准：20mg/ml蛋白酶K配制标准（proteinase K）：将200mg的蛋白酶K加入到9.5ml水中，轻轻摇动，直至蛋白酶K完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到...

蛋白质提取问题
：答：50mM/L Tris-HCl pH 7.4.五、植物材料：水稻苗，叶鞘，根(ynibcas)1、200 毫克样品置于冰上磨碎 2、加lysis buffer，离心，10000rpm，4度，5min 取上清 3、重复离心5min lysis buffer：urea np-40 ampholine 2-me pvp-40 六、蛋白质样品制备(sigma)秧苗蛋白质样品的提取按Davermal 等(1986...

DTNB是什么?
：答：配置方法：准确称取0.198gDTNB用50mMNa2HPO4（pH＝7.0）配制成50ml溶液，存放于棕色瓶中，于暗处低温保存备用。应该注意的是配置缓冲、浓度，储存时要避免见光。应用举例：半胱氨酸中自由巯基的定量检测方法 一、试剂的配制：1、Tris－HCL缓冲液（0.25M）：DDW准确配制后，用盐酸调节pH＝8.3；2、...

如何对某种生物进行全面的基因组学研究?
：答：(1) 材料 Tris/葡萄糖缓冲液(20mmol/L Tris-HCl pH8.0,10mmo1/L EDTA,50mmo1/L 葡萄糖),1% SDS,0.2mo1/L NaOH,异丙醇,TE缓冲液pH8.0,4mol/L LiCl,冰冷 70%和无水乙醇,2mol/L NaOH,2mmol/L EDTA。 (2) 配制方法①取1.5ml处于对数生产期的培养菌液(含有待测病毒核酸的重组质粒模板),离心除去...

2021-03-30 用于基因工程的工具酶
：答：II类酶的酶活条件:Tris-HCl PH7.5, 25-50mM;10mM MgCl2 ;NaCl 0-150mM; DTT 1mM 根据不同酶对盐离子要求不同,可将缓冲液分为以下三种情况: 高盐:100-150mM 中盐:50-100mM 低盐:0-50mM 二,酶切操作 DNA量的确定,加入酶量的确定,发应体积的确定(20μl),反应时间的确定,1-1.5hr,一般为37℃,但...

大肠杆菌质粒DNA怎样提取,用什么方法?
：答：1、接1%含质粒的大肠杆菌细胞于2ml LB培养基。2、37℃振荡培养过夜。3、取1.5ml菌体于Ep管，以4000rpm离心3min，弃上清液。4、加0.lml溶液I(1％葡萄糖，50mM/L EDTA pH8.0，25mM/L Tris-HCl pH8.0)充分混合。5、加入0.2ml溶液 II(0.2 mM/L NaOH，1％ SDS)，轻轻翻转混匀，置于冰...

细胞裂解液成分及类型
：答：b. Tris-cl和Tris-HCl是一个东西，就是写法上有所不同，即常说的Tris酸；c. Tris-HCl就是在Tris-base的溶液中加入适当量的盐酸，调成你所需要的PH值。2.    常用裂解液种类：（1）NP40 lysis buffer：a. 主要成分50mM Tris(pH7.4)，150mM NaCl，1% NP-40。b. 概述：NP-...

雷玉翰18491285327：    50mM的tris - hcl怎么配制 -
殷谢聪:      ： 先配50mM的tris-base (mw=121.14).然后再用Hcl调pH至7.5 称6g的tris-base,加水至900mL.加Hcl调至7.5,补水至1L

雷玉翰18491285327：    请问5mM Tris - HCl 50mM NaCl pH=7.0怎么配?最好详细点,偶是新手. -
殷谢聪:      ： 5mM Tris-HCl配法:50毫升0.1M三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液与45.7毫升0.1M盐酸混匀后,加水稀释至100毫升.这是pH7.1的 你要7.0的话就再加一些HCl 用pH计调到7.0.. 50mM NaCl pH=7.0配法:直接称2.92 g NaCl,加水到1 L然后用0.1 M盐酸或者0.1 M NaOH调pH到7.0.

雷玉翰18491285327：    50mmol/L的Tris - HCl(pH8.0)溶液的配置步骤 -
殷谢聪:      ： 以配1L为例: Tris的分子量为121.14需要Tris为121.14*50/1000=6.057,即需要Tris6.057g.用大约双蒸水800ml溶解这些Tris.然后用合适浓度HCl(比如1mol/L,或者0.5mol/L的都行)调节pH到8.0.然后加双蒸水,定容到1000ml.如果粗略定容可以用量筒,精确可以用容量瓶.

雷玉翰18491285327：    50mM的tris - hcl怎么配制请问高位高手,50mM的tris - hcl(PH7.5)怎么配制 -
殷谢聪:      ：[答案] 先配50mM的tris-base (mw=121.14).然后再用Hcl调pH至7.5 称6g的tris-base,加水至900mL.加Hcl调至7.5,补水至1L

雷玉翰18491285327：    在做wb实验中,tris - triton,NP - 40,RIPA,有什么作用 -
殷谢聪:      ： western blotting的Lysis buffer,是裂解细胞提取蛋白用的裂解液. SDS是十二烷基硫酸钠, RIPA裂解液组成: 50 mM Tris-HCl (pH 7.4,三羟甲基氨基甲烷-盐酸), 150 mM NaCl, 1% NP-40,0.1% SDS(不同公司的配比不同,有用Tris-hcl PH=8.0...

雷玉翰18491285327：    50mm的edta需要用depc水配制吗
殷谢聪:      ： 1 M Tris-HCl (pH7.4, 7.6, 8.0) 组份浓度:1 M Tris-HCl 配制量:1 L 配制方法:1. 称量121.1 g Tris置于1 L烧杯中.2. 加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解.3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值. PH值 浓HCl7.4 约70ml7.6 约60ml8.0 约...

雷玉翰18491285327：    tris - hcl固体如何配置成(1M PH8.0)的溶液,不是单独的tris碱. -
殷谢聪:      ： 1L 30mM Tris-HCl,0.5M 蔗糖,0.5mM EDTA,pH8.0配制方法一: 精确称取Tris固体3.63g,蔗糖固体171.15g,EDTA固体0.146g于1L烧杯中 加入蒸馏水越900ml,搅拌溶解固体试剂 滴加HCl调节pH至8.0 加入蒸馏水定容至1000mlEDTA固体称取较少,可以配制成50mM的母液,即称取14.6g EDTA固体溶解于1L蒸馏水中. 配制方法二: 精确称取Tris固体3.63g,蔗糖固体171.15g于1L烧杯中 加入蒸馏水越900ml,搅拌溶解固体试剂,加入10ml的50mM EDTA母液 滴加HCl调节pH至8.0 加入蒸馏水定容至1000ml

雷玉翰18491285327：    通常情况下,PCR体系中各试剂加入量的依据是什么? -
殷谢聪:      ：[答案] 依据经验吧 25~50mM KCl——促进引物退火,>50mM会抑制Taq酶的活性. 10~50mM Tris•Cl(pH 8.4)——维持 Taq 酶作用环境的偏碱性 1.5mM MgCl2 ——Mg2+是Taq酶活性所必须的金属离子. Mg2+浓度的高低能影响反应的特异性和扩增片段的产...

雷玉翰18491285327：    论文中2 mM Tris - HCl and 50 mM mannitol pH 71是甚么意思?怎样配置?
殷谢聪:      ： Tris-HCl是1种缓冲溶液,所以后面有指pH7.1,50mMmannitol是甘露醇溶液.2mM是缓冲溶液里的盐浓度,所以计算出来盐浓度,用tris配,再加上甘露醇,加入后浓度为50mM,然后用HCl调理至pH7.1就对了

雷玉翰18491285327：    0.01mol/L PH7.2的Tris - Hcl怎么配置啊把50MM的缩小5倍就是10MM?明显是不对的,急 -
殷谢聪:      ：[答案] (十)Tris-HCl缓冲液(0.05 mol/L)50毫升0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液与X毫升0.1mol/L盐酸混匀并稀释至100毫升.pH (25℃) X (mL) 7.10 45.7 7.20 44.7 7.30 43.4 7.40 42.0 7.50 40.3 7.60 38.5 7.70 36....

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