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微生物学中灭菌效果是否彻底的标志是什么?

来源:www.zuowenzhai.com    作者:编辑   日期:2024-05-28
微生物学实验室常用的灭菌方法有哪些

物理方法
1、温度

利用温度进行灭菌、消毒或防腐,是最常用而又方便有效的方法。高温可使微生物细胞内的蛋白质和酶类发生变性而失活,从而起灭菌作用,低温通常起抑菌作用。
1 干热灭菌法:
a.灼烧灭菌法:利用火焰直接把微生物烧死。此法彻底可靠,灭菌迅速,但易焚毁物品,所以使用范围有限,只适合于接种针、环、试管口及不能用的污染物品或实验动物的尸体等的灭菌。

b.干热空气灭菌法:这是实验室中常用的一种方法,即把待灭菌的物品均匀地放入烘箱中,升温至160℃,恒温1小时即可。此法适用于玻璃皿、金属用具等的灭菌。
2 湿热灭菌法:
在同样的温度下,湿热灭菌的效果比干热灭菌好,这是因为一方面细胞内蛋白质含水量高,容易变性。另一方面高温水蒸汽对蛋白质有高度的穿透力,从而加速蛋白质变性而迅速死亡。

a.巴氏消毒法:有些食物会因高温破坏营养成分或影响质量,如牛奶、酱油、啤酒等,所以只能用较低的温度来杀死其中的病原微生物,这样既保持食物的营养和风味,又进行了消毒,保证了食品卫生。该法一般在62℃,30分钟即可达到消毒目的。此法为法国微生物学家巴斯德首创,故名为巴氏消毒法。

b.煮沸消毒法:直接将要消毒的物品放入清水中,煮沸15分钟,即可杀死细菌的全部营养和部分芽孢。若在清水中加入1%碳酸钠或2%的石炭酸,则效果更好。此法适用于注射器、毛巾及解剖用具的消毒。

c.间歇灭菌法:上述两种方法在常压下,只能起到消毒作用,而很难做到完全无菌。若采用间歇灭菌的方法,就能杀灭物品中所有的微生物。具体做法是:将待灭菌的物品加热至100℃,15~30分钟,杀死其中的营养体。然后冷却,放入37℃恒温箱中过夜,让残留的芽孢萌发成营养体。第2天再重复上述步骤,三次左右,就可达到灭菌的目的。此法不需加压灭菌锅,适于推广,但操作麻烦,所需时间长。

d. 加压蒸汽灭菌法:这是发酵工业、医疗保健、食品检测和微生物学实验室中最常用的一种灭菌方法。它适用于各种耐热、体积大的培养基的灭菌,也适用于玻璃器皿、工作服等物品的灭菌。

加压蒸汽灭菌是把待灭菌的物品放在一个可密闭的加压蒸汽灭菌锅中进行的,以大量蒸汽使其中压力升高。由于蒸汽压的上升,水的沸点也随之提高。在蒸汽压达到1.055公斤/厘米2时,加压蒸汽灭菌锅内的温度可达到121℃。在这种情况下,微生物(包括芽孢)在15~20分钟便会被杀死,而达到灭菌目的。如灭菌的对象是砂土、石蜡油等面积大、含菌多、传热差的物品,则应适当延长灭菌时间。

在加压蒸汽灭菌中,要引起注意的一个问题是,在恒压之前,一定要排尽灭菌锅中的冷空气,否则表上的蒸汽压与蒸汽温度之间不具对应关系,这样会大大降低灭菌效果。
3 影响灭菌的因素:
a.不同的微生物或同种微生物的不同菌龄对高温的敏感性不同。多数微生物的营养体和病毒在50~65℃,10分钟就会被杀死;但各种孢子、特别是芽孢最能抗热,其中抗热性最强的是嗜热脂肪芽孢杆菌,要在121℃,12分钟才被杀死。对同种微生物来讲,幼龄菌比老龄菌对热更敏感。

b.微生物的数量多少显然会影响灭菌的效果,数量越多,热死时间越长。

c.培养基的成分与组成也会影响灭菌效果。一般地讲,蛋白质、糖或脂肪存在,则提高抗热性,pH在7附近,抗热性最强,偏向两极,则抗热能力下降,而不同的盐类可能对灭菌产生不同的影响;固体培养基要比液体培养基灭菌时间长。
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灭菌对培养基成分的影响:
a.pH值普遍下降。

b.产生混浊或沉淀,这主要是由于一些离子发生化学反应而产生混浊或沉淀。例如Ca+2与PO4-3化合,就会产生磷酸钙沉淀。

c.不少培养基颜色加深。

d.体积和浓度有所变化。

e.营养成分有时受到破坏。

2、辐射

利用辐射进行灭菌消毒,可以避免高温灭菌或化学药剂消毒的缺点,所以应用越来越广,目前主要应用在以下几个方面:

1)接种室、手术室、食品、药物包装室常应用紫外线杀菌。

2)应用β射线作食品表面杀菌,γ射线用于食品内部杀菌。经辐射后的食品,因大量微生物被杀灭,再用冷冻保藏,可使保存期延长。

3、过滤

采用机械方法,设计一种滤孔比细菌还小的筛子,做成各种过滤器。通过过滤,只让液体培养基从筛子中流下,而把各种微生物菌体留在筛子上面,从而达到除菌的目的。这种灭菌方法适用于一些对热不稳定的体积小的液体培养基的灭菌以及气体的灭菌。它的最大优点是不破坏培养基中各种物质的化学成分。但是比细菌还小的病毒仍然能留在液体培养基内,有时会给实验带来一定的麻烦。
二 化学方法
一般化学药剂无法杀死所有的微生物,而只能杀死其中的病原微生物,所以是起消毒剂的作用,而不是灭菌剂。

能迅速杀灭病原微生物的药物,称为消毒剂。能抑制或阻止微生物生长繁殖的药物,称为防腐剂。但是一种化学药物是杀菌还是抑菌,常不易严格区分。消毒剂在低浓度时也能杀菌(如1:1000硫柳汞)。由于消毒防腐剂没有选择性,因此对一切活细胞都有毒性,不仅能杀死或抑制病原微生物,而且对人体组织细胞也有损伤作用,所以只能用于体表、器械、排泄物和周围环境的消毒。

常用的化学消毒剂有:石碳酸、来苏水(甲醛溶液)、氯化汞、碘酒、酒精等。答案来自

杀菌的方法和结果不同,罐头杀菌通常用高温加热的方法,而微生物学中杀菌是用试剂。罐头杀菌杀掉的是在较高温度下不宜生存的常见的对人体有害的菌类,而微生物杀菌是杀掉除实验菌种外的一切菌种。

灭菌是否彻底要看灭菌方法和灭菌参数,从方法上来讲,还是采用湿热灭菌也就是蒸汽灭菌较为彻底,就是采用湿热灭菌,也分为流通蒸汽灭菌、残存概率法灭菌和过度灭菌法等3种,其中过度灭菌法是灭菌最为彻底的,它的无菌保证值达到12以上。所以灭菌效果是否彻底的标志应该是无菌保证值。越大越彻底。

一段时间内气体成分不变。。由于微生物会呼吸作用。

微生物残留值小于百分之五

做对比试验,不同东西要求不同
玻璃仪器一般是干热灭菌,160度灭两个小时,东西多可以延长时间或增加温度。培养基,无菌液用湿热灭菌121度灭30分钟,也可根据要求来。不过最好保证仪器每年要检

灭菌最难出去的物质应该是芽孢了,当无芽孢存在时就可以认为灭菌彻底了。


15537884157判断彻底灭菌效果的依据是
东泳战答:芽孢被完全消灭。根据查询多特软件站网显示,判断灭菌是否彻底必须以杀灭芽孢为标准,芽孢是指产芽孢微生物为了抵御不良条件,细胞的正常生长和分裂停止,细胞质脱水浓缩,逐步形成一个圆形、椭圆形或圆柱形的高抗逆性休眠体,芽孢的形成都是在细胞内。

15537884157灭菌是否彻底的标志
东泳战答:彻底灭菌的标志是“是否有芽孢”灭菌如果只把细菌消灭掉那是不行的。为什么呢?因为细菌处在不良环境时会变成芽孢,而芽孢对不良环境有较强的抵抗能力。灭菌如果没有把芽孢消灭掉,那么环境一旦适宜的话,芽孢又会从新变回细菌。所以灭菌一定要把芽孢给消灭掉。

15537884157在药物制剂的过程中常需要灭菌,判断灭菌是否彻底的依据是( )。
东泳战答:【答案】:C 灭菌是指用物理或化学等方法杀灭或除去所有微生物繁殖体和芽胞的手段。灭菌效果应当以杀死芽胞为准。

15537884157如何判定配制的培养基灭菌是否彻底
东泳战答:标上记号,置室温一周左右进行检查。如果培养基没有什么变化(未长菌),说明灭菌效果良好。灭菌的彻底程度受灭菌时间与灭菌剂强度的制约。微生物对灭菌剂的抵抗力取决于原始存在的群体密度、菌种或环境赋予菌种的抵抗力。灭菌是获得纯培养的必要条件,也是食品工业和医药领域中必需的技术。

15537884157为什么将杀灭芽胞与否作为判断灭菌效果是否彻底的标准?
东泳战答:因为芽胞是细菌抵抗不利环境的休眠体,只有杀死芽胞才算严格灭菌.

15537884157检验微生物学实验和食品加工生产中是否完全灭菌的标准是是否有芽孢
东泳战答:一、湿热灭菌法是指用饱和水蒸气、沸水或流通蒸汽进行灭菌的方法,由于蒸汽潜热大,穿透力强,容易使蛋白质变性或凝固,所以该法的灭菌效率比干热灭菌法高,是最常用的灭菌方法。湿热灭菌法可分为:煮沸灭菌法、巴氏消毒法、高压蒸汽灭菌法、流通蒸汽灭菌法、和间歇蒸汽灭菌法。(1)煮沸灭菌法:将水...

15537884157如何判定配制的培养基灭菌是否彻底
东泳战答:如果怕高压不充分,灭菌不彻底,可一每次多配置一小份同样的培养基,高压后放置培养箱中,如果该小份培养基出现大量菌增殖现象,说明灭菌不充分,反之则是无菌的。普通培养基为121摄氏度20分钟,以保证灭菌效果和不损伤培养基的有效成份。经灭菌后如需要作斜面固体培养基,则灭菌后立即摆放成斜面,斜面...

15537884157用生物指标法进行压力蒸汽灭菌效果监测,培养基为何种颜色说明灭菌不彻底...
东泳战答:这个要查看指示剂说明...不同的指示剂标注的颜色可能不一样的,一般来说变色就说明灭菌不彻底的。

15537884157微生物中物理和化学方法检验灭菌效果
东泳战答:化学检测法:将化学指示卡放人每一个待灭菌的物品包中央,经一个灭菌周期后,取出指示卡,根据颜色的改变判断是否达到灭菌条件。如果指示卡的颜色变至规定的条件,认为该包灭菌合格。(医院常用这种方法)物理检测法:将多点温度检测仪的多个探头分别放于灭菌器各层内、中、外各点。关好柜门;将导线引出...

15537884157以什么来衡量灭菌方法的灭菌效果?
东泳战答:在高压蒸汽灭菌中,灭菌温度随蒸汽压力的增加而升高(图2-6)。搜狗问问 图2-6 高压蒸汽灭菌锅 在使用高压灭菌锅时,要完全排出锅内的空气而以饱和蒸汽代之。如果空气不排除干净,则锅内温度将低于同样压力下由纯饱和蒸汽产生的温度,影响灭菌效果。此法适用于各种耐热物品的灭菌,如一般培养基、生理...


(编辑:魏澜咱)
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