如何测定黄瓜中多酚氧化酶的活性

常用检压法和分光光度法。前者应用多酚氧化酶（PPO）可催化儿茶素等底物在有氧条件下的氧化还原反应，根据底物的氧化速率与单位酶浓度和单位时间内的耗氧量成正比这一原理，用瓦氏呼吸仪测定反应过程中的耗氧量求得PPO活性的大小，此方法设备简便，但操作复杂，误差较大。后者利用邻苯二酚和D-儿茶素在PPO催化下生成有色产物.其显色物质在460纳米处有最大吸收，吸收值在单位时间内的变化和单位酶活性成正比，计算PPO活性强度。操作方法简便，重现性好。与检压法原理相似的方法有氧电极法，应用也较多。

假设配制一升0.05M 柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液
pH = pKa2 + Log[摩尔(Na2HCit)/摩尔(NaH2Cit)]
4.5= 4。76 + Log[摩尔(Na2HCit)/摩尔(NaH2Cit)]
那么,
(1)[摩尔(NaH2Cit)/摩尔(Na2HCit)]=10^0.26
又，
（2）摩尔(Na2HCit)/摩尔(NaH2Cit)= 1 x 0.05 = 0.05 摩尔
解联立方程组（1）和（2）可求出所需的：
摩尔(Na2HCit)/摩尔(NaH2Cit)
再乘以它们的分子量就得到所需的重量了。

13865681438：多酚氧化酶活性的测定
康珠晏 ：答：检压法：检压法是一种较简便的测定酶活性的方法，它的基本原理是根据底物的氧化速率与单位酶浓度和单位时间内的耗氧量成正比，用瓦氏呼吸仪测定反应过程中的耗氧量，求得PPO活性的大小。在实际应用中，多酚氧化酶活性的测定对于了解果蔬的成熟过程，以及研究果蔬的贮藏加工过程中的变化等都具有重要的意义...

13865681438：多酚氧化酶测定
康珠晏 ：答：多酚氧化酶测定如下：分光光度法是常用的检测方法。该方法利用邻苯二酚和D-儿茶素在多酚氧化酶(PPO)催化下生成有色产物，其显色物质在波长410nm处有最大吸收，吸收值在单位时间内的变化和单位酶活性成正比，从而计算PPO活性强度。此方法操作简单、准确性好，应用范围较广。按照反应时间，分光光度法测定...

13865681438：多酚氧化酶活性的测定
康珠晏 ：答：常用检压法和分光光度法。前者应用多酚氧化酶（PPO）可催化儿茶素等底物在有氧条件下的氧化还原反应，根据底物的氧化速率与单位酶浓度和单位时间内的耗氧量成正比这一原理，瓦氏呼吸仪测定反应过程中的耗氧量求得PPO活性的大小，此方法设备简便，但操作复杂，误差较大。后者利用邻苯二酚和D-儿茶素在PPO...

13865681438：果蔬中PPO多酚氧化酶酶活的测定方法
康珠晏 ：答：薄层色谱(TLC)和高效液相色谱(HPLC)法鉴定

13865681438：多酚氧化酶活性检测试剂盒(邻苯二酚法)
康珠晏 ：答：它的活性检测，尤其邻苯二酚法，是通过其催化邻苯二酚氧化生成的醌在410纳米处的特征吸收峰来衡量的。通过观察吸光值的变化，便能准确揭示多酚氧化酶的活力水平。该试剂盒包含三部分：提取液、试剂一和试剂二，分别在4℃、4℃避光和4℃保存，确保了活性的稳定性。为了得到精准的实验结果，你需要的工具...

13865681438：采用比色法测定多酚氧化酶活力的具体步骤有哪些?
康珠晏 ：答：这个不需要什么的吧，只需要准备好比对试纸，滴管和需要比对的溶液就可以了，然后用滴管吸取需要比对的溶液，滴到试纸上，然后看试纸变化和标准进行比对

13865681438：多酚氧化酶的酶活力是多少
康珠晏 ：答：1928U/mg。以马铃薯为原料提取多酚氧化酶,进行了分离纯化,得到比活力为1928U/mg，纯化倍数为9.4的部分纯化的马铃薯多酚氧化酶，研究马铃薯多酚氧化酶的理化性质，该酶作用的最适温度和pH分别是30℃和pH 6.0，酶在低于50℃和在pH5.15-8.75范围内稳定。

13865681438：多酚氧化酶邻苯三酚比色法(追加)
康珠晏 ：答：一、目的 通过实验，掌握植物体内多酚氧化酶活性的测定方法。二、原理 多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶，在有氧的条件下，能使一元酚和二元酚氧化产生醌。用分光光度法在525nm波长下测其吸光度，即可计算出多酚氧化酶的活力和比活性。反应式如下：多酚氧化酶 邻苯二酚（儿茶酚）＋1∕2 O2 ———→...

13865681438：酶活力的测定方法及原理
康珠晏 ：答：3. 多酚氧化酶（Polyphenoloxidase，PPO）活性的测定 PPO活性测定采用邻苯二酚法（Aquino-Bolaños和Mercado-Silva，2004）。用酶标仪进行测定时按比例调整为总反应体积为400μL。350µL反应液（用50mmol/L，pH6.4的PBS配制，内含100µmol/L邻苯二酚）中加入50 µL的粗酶液，...

13865681438：多酚氧化酶是什么?
康珠晏 ：答：醌类参与细胞壁物质的合成及代谢，能与蛋白质等大分子物质形成聚合物，限制病原菌的扩展。病原物侵染可诱导多酚氧化酶活性变化，且与抗病性表达有关。黄瓜被枯萎病菌侵染后，抗病品种多酚氧化酶活性明显增强（徐建华等，1995）。用赤霉病菌接种后，感病小麦品种穗组织中有抗坏血酸（ascorbicacid）积累，...