能把测定磷酸酶的具体方法发我一下吗？我看了好几份方法，但是不够具体，比如磷酸苯二钠是用什么缓冲液
您具体是做什么的？做实验还是做生产的？找我
碱性磷酸酶的特意性很低，它升高的原因可以分为生理性原因和病理性原因，生理性原因包括机体活动旺盛，例如骨折愈合，骨骼生长等都可能偏高。病理性原因 包括阻塞性黄疸、肝癌、胆汁淤积性肝炎等。...
酸性及中性磷酸酶活性的测定—比色法操作步骤：称5 g风干土置于200 mL三角瓶中，加1 mL甲苯，加入20 mL0.5%磷酸苯二钠（酸性磷酸酶用醋酸盐缓冲液，中性的磷酸盐用柠檬酸盐缓冲液），仔细 匀后放入恒温箱，在37℃下培养12 h。取培养后的滤液5 mL，并按绘制标准曲线所述方法显色。（置于50 mL容量瓶中，分别加入20mL蒸馏水。再加入0.25 mL缓冲液、0.5 mL 4-氨基安替比林液，0.5 mL铁氰化钾液。每次加入试剂要充分摇动，最后定容至50 mL.在15 min内，在分光光度计上于510 nm处比色测定溶液的光密度）。比色测定。该实验以酚工作液的不同浓度为横坐标，光密度值为纵坐标绘制标准曲线。 结果计算：磷酸酶活性，以24 h后1 g土壤中释出的酚毫克数表示。
酚（mg）=a*(V1/V2)*(100/W)*0.32*2.29) 式中a----滤液中酚的毫克数；V1----磷酸苯二钠体积数；V2-----所取的滤液体积数； W-----风干土土重；0.32----以磷单位表示结果的系数（在磷酸苯二钠中，1个重量单位的酚相当于0.32重量单位的磷）； 2.29----将P换算为P2O5的系数
19541778792：磷酸单酯酶测定方法
崔玉战
：答：比色法测定。比色法测定是基于酶促反应前后物质含量的变化来计算酶活性的一种方法。在磷酸单酯酶的测定中，底物对硝基苯磷酸二钠在酶的作用下生成对硝基苯酚，后者在碱性条件下呈现黄色，可以通过比色法测定其含量。通过对不同浓度下的标准品进行同样的操作，绘制标准曲线，可以求出反应后释放的对硝基苯...
19541778792：...硝基苯磷酸盐(即PNPP)法测定碱性磷酸酶(ALP)活性?
崔玉战
：答：（1）用吸管吸掉96孔板内的培养液，用PBS冲洗3遍，加入含25mmol/L二乙醇胺，1mmol/L氯化镁和6.7mmol/L PNPP的反应液。（2）每孔150ul.37℃避光放置半小时,然后加0.1mol/L氢氧化钠100ul终止反应,用酶标仪于405nm波长下测定OD值.（3）样品OD值在ALP标准曲线上读取酶活性值(U/L).ALP标准曲线...
19541778792：碱性磷酸酶升高的原因及检查方法
崔玉战
：答：碱性磷酸酶升高主要见于:阻塞性黄疸、原发性肝癌、继发性肝癌、胆汁淤积性肝炎等。領骨骼疾病由于骨组织中此酶亦很活跃。因此,孕妇、骨折愈合期、骨软化症。佝偻病、骨细胞癌、骨质疏松等血清碱性磷酸酶会升高。喝白血病、甲状腺机能亢进白血病、甲状腺机能亢进时,血清碱性磷酸酶亦可升高。检查方法如果有条件...
19541778792：土壤磷酸酶活性的测定方法
崔玉战
：答：土壤酶活性的测定方法 土壤酶活性的测定：酸性磷酸酶采用磷酸苯二钠比色法测定；过氧化氢酶活性采用KMnO4滴定；脲酶采用扩散滴定法测定；蛋白酶活性采用茚三酮比色法测定；转化酶活性以0.1N的Na2S2O3滴定法测定；脱氢酶活性采用三苯基甲比色法[4-5]参考资料：广州市城市森林土壤重金属污染状况及其评价 ...
19541778792：用磷酸苯二钠法测定磷酸酶活性的标准曲线怎么做?
崔玉战
：答：1、3．05、3．0、2．9、2．8、2．7ml。混匀后37℃水浴保温5分钟，各管加入1．Oml碱性溶液，再加0．5％铁氰化钾2．Oml，立即混匀。静置10分钟，510nm波长下比色。将以上各管所得读数与其相应的碱性磷酸酶单位<依次为0.5、10、20、30、40单位)在坐标纸上作图，绘制成标准曲线。
19541778792：抗酒石酸酸性磷酸酶的测定方法
崔玉战
：答：现在可以使用人骨纯化的破骨细胞TRACP - 5b 抗原制备的能识别人破骨细胞的单克隆抗体, 通过免疫分析的方法测定TRACP - 5b。此法特异性更强, 操作简便, 仅检测血清中有活性的TRACP - 5b 分子, 而不会受到无活性的TRACP - 5b 的干扰。静脉血长时间暴露于空气中可以引起血pH 值升高, TRACP 活性发生...
19541778792：试述显示细胞内DNA和碱性磷酸酶的原理和方法。
崔玉战
：答：【答案】：(1) 细胞内特异显示DNA的方法是福尔根反应：首先用酸水解去除RNA，仅保留DNA，同时除去DNA上嘌呤脱氧核糖核苷酸的嘌呤，使脱氧核糖的醛基暴露，所暴露的自由醛基与希夫试剂反应呈紫色，从而显示细胞内DNA所在部位。(2) 特异检测碱性磷酸酶的方法是格莫瑞方法：①样品制备时首先要保持酶的活性...
19541778792：酶活性分析的常用方法
崔玉战
：答：在上半个世纪建立了一些适用于常规工作的测酶活性浓度的方法,如测定淀粉酶的Somogyi法,碱性磷酸酶的Bodansky法、King法等等。这些方法都是在酶和底物作用一段时间后停止酶反应,加入各种化学试剂与产物或基质反应呈色,用比色计在可见光处比色,同时将被测物质作标准管或标准曲线,比较后计算出在此段时间内产物生成量...
19541778792：碱性磷酸酶km值测定改进方法
崔玉战
：答：该值测定改进方法如下：双倒数法，直接线性回归法，双重倒数法。1、双倒数法：通过绘制酶速度的倒数与底物浓度的倒数的线性关系图，可以得到直观的KM值。2、直接线性回归法：将酶速度与底物浓度进行线性回归分析，通过回归方程的斜率和截距来计算KM值。3、双重倒数法：通过绘制酶速度的倒数与底物浓度的...
19541778792：碱性磷酸酶米氏常数的测定
崔玉战
：答：碱性磷酸酶是一种酶类，广泛用于医学、食品和化学工业等领域，在医学上碱性磷酸酶可以测定肝病和骨疾病等，还可以用于治疗白细胞病，在食品工业中碱性磷酸酶可以用于制作啤酒、饮料和奶酪等产品，在化学工业中碱性磷酸酶可以用于催化合成制药化合物、生产洗涤剂和制造纸浆等。性磷酸酶还可以诊断一些疾病以及...
