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基因工程中转化的方法有哪些?什么是载体转化法?

来源:www.zuowenzhai.com    作者:编辑   日期:2024-06-15
常用的基因工程载体有哪些

您好!三种常用的载体是质粒、λ噬菌体的衍生物和动植物病毒,最常用的是质粒。在基因操作过程中使用运载体有两个用途:一是用它作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞中去;二是利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制。

转化(transformation)是某一基因型的细胞从周围介质中吸收来自另一基因型的细胞的DNA而使它的基因型和表现型发生相应变化的现象。该现象首先发现于细菌。
化学法(化学药物如氯化钙等)转化氯化钙法转化细胞 细菌处于0℃及CaCl2低渗溶液中时,菌细胞膨胀成球形.转化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基-钙磷酸复合物粘附于细胞表面,经42℃短时间热击处理促进细胞吸收DNA复合物。
直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”,又叫“散弹射击法”
具体做法:用限制酶将供体细胞中的DNA切成许多片段,将这些片段分别载入运载体,然后通过运载体分别载人不同的受体细胞,让供体细胞所提供的DNA(外源DNA)的所有片段分别在各个受体细胞中大量复制(在遗传学中叫扩增),从中找出含有目的基因的细胞,再用一定的方法把带有目的基因的DNA片段分离出来。但这种方法工作量大,具有一定的盲目性。20世纪80年代以后,随着DNA核苷酸序列分析技术的发展,人们已经可以通过DNA序列自动测序仪对提取出的基因进行核苷酸序列分析,并且通过一种扩增DNA的新技术(也叫PCR技术),使目的基因片段在短时间内成百万倍地扩增。上述新技术的出现大大简化了基因工程的操作技术。

通过转化将载体DNA导入受体菌继而得到含有目的DNA插入的转化菌株是构建DNA文库最为关键的一步。
化学法(化学药物如氯化钙等)转化
氯化钙法转化细胞 细菌处于0℃及CaCl2低渗溶液中时,菌细胞膨胀成球形。转化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基-钙磷酸复合物粘附于细胞表面,经42℃短时间热击处理促进细胞吸收DNA复合物。

直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”,又叫“散弹射击法”。具体做法:用限制酶将供体细胞中的DNA切成许多片段,将这些片段分别载入运载体,然后通过运载体分别载人不同的受体细胞,让供体细胞所提供的DNA(外源DNA)的所有片段分别在各个受体细胞中大量复制(在遗传学中叫扩增),从中找出含有目的基因的细胞,再用一定的方法把带有目的基因的DNA片段分离出来。但这种方法工作量大,具有一定的盲目性。20世纪80年代以后,随着DNA核苷酸序列分析技术的发展,人们已经可以通过DNA序列自动测序仪对提取出的基因进行核苷酸序列分析,并且通过一种扩增DNA的新技术(也叫PCR技术),使目的基因片段在短时间内成百万倍地扩增。上述新技术的出现大大简化了基因工程的操作技术。

我补充一下< 慕翊徵>童鞋的
还有我国自主研发的 花粉管通道法 (*^__^*) 嘻嘻……例如我国的抗虫棉《BT病毒基因》的就是运用这种方法.

你想问偏微生物的,植物的,还是动物的基因工程??它们之间是有一定差异的


18599462498基因工程中转化的方法有哪些
冯淑顷答:化学法(化学药物如氯化钙等)转化氯化钙法转化细胞 细菌处于0℃及CaCl2低渗溶液中时,菌细胞膨胀成球形.转化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基-钙磷酸复合物粘附于细胞表面,经42℃短时间热击处理促进细胞吸收DNA复合物。直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”,又叫“散弹射击法”具体做法:用限制酶将供体...

18599462498基因工程的操作过程的主要步骤包括哪些
冯淑顷答:方法:转化——某一基因型细胞从周围介入中吸收另一基因型细胞的DNA,而使其基因型和表型发生相应变化的形象;转染——出去蛋白质外壳的病毒核酸感染细胞或原生质体的过程;转导——用噬菌体做载体,将一个细胞的基因传递给另一个细胞的过程。还有显微注射等。增:培养已转化细胞,使目的基因在其中进行复...

18599462498基因工程中什么过程叫“转化”?
冯淑顷答:被动转化:用含有目的基因的农杆菌侵染植物伤口,从而将目的基因插入植物基因组中,从而实现遗 传转化。

18599462498基因工程技术有哪些
冯淑顷答:问题一:基因工程包括哪些 是,基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术,是以分子遗传学为理论基础,以分子生物学和微生物学的现代方法为手段,将不同来源的基因按预先设计的蓝图,在体外构建杂种DNA分子,然后导入活细胞,以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。基因工程技术为基因的结构和功能的研究提供了有力...

18599462498基因工程有哪些方将外来基因转入植物中
冯淑顷答:将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法(农杆菌是一种在土壤中生活的微生物,能在自然条件下感染双子叶植物和裸子植物,而对大多数单子叶植物没有感染能力。)除此之外还有基因枪法(又称微弹轰击法,对单子叶植物较好,但是成本太高了)和花粉管通道法 ...

18599462498基因工程中什么过程叫“转化”
冯淑顷答:1944年美国细菌学家O.T.埃弗里等从元素分析、酶学分析、血清学分析以及生物活性鉴定等方面证实了无细胞抽提物中引起肺炎双球菌荚膜转化的转化因子是脱氧核糖核酸(DNA),第一次为遗传物质是DNA而不是蛋白质提供了直接的证据。

18599462498在基因工程中将目的基因导入玉米中应采用什么方法?
冯淑顷答:高中阶段接触到的有:农杆菌转化法,基因枪法,花粉管通道法 花粉管通道法是我国自主研发的,成本较低,而基因枪法成本较高。农杆菌转化法较为便捷,但是不能感染单子叶植物…… 玉米属于单子叶植物,所以可以用花粉管通道法,或者是基因枪法

18599462498请问基因工程的核心技术有哪些
冯淑顷答:所谓基因工程是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术。它是用人为的方法将所需要的某一供体生物的遗传物质——DNA大分子提取出来,在离体条件下用适当的工具酶进行切割后,把它与作为载体的DNA分子连接起来,然后与载体一起导入某一更易生长、繁殖的受体细胞中,以让外源物质在其中“安家落户”,进行正常...

18599462498基因工程中较容易被转化的植物有什么?
冯淑顷答:1、没有组培条件或组培条件较差时,拟南芥、本氏烟草、矮牵牛等,采用沾花侵染和花粉管通道法等。2、能进行一般组织培养,大花烟草、苜蓿、水稻(主要是日本青、中花11等),采用基因枪法、农杆菌法转化。3、能够进行原生质体悬浮细胞培养等,胡萝卜、大花烟草等,超声波、电转、PEG介导等。4、具有...

18599462498什么是基因工程?
冯淑顷答:一般来说,基因工程是指在基因水平上的遗传工程,它是用人为方法将所需要的某一供体生物的遗传物质--DNA大分子提取出来,在离体条件下用适当的工具酶进行切割后,把它与作为载体的DNA分子连接起来,然后与载体一起导入某一更易生长、繁殖的受体细胞中,以让外源遗传物质在其中"安家落户",进行正常复制和表达,从而获得新...


(编辑:越媛涛)
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