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高考 什么是DNA分子杂交技术?

来源:www.zuowenzhai.com    作者:编辑   日期:2024-05-28
DNA探针的作用是什么? (高三基因工程) DNA分子杂交技术又是什么?在哪里用到?

DNA探针的作用是用DNA探针进行的杂交试验。将未配对结合的探针洗去后,可用放射自显影或酶联反应等检测系统检测杂交反应中单个碱基突变和单个碱基的错配。
DNA分子杂交技术是一种对基因工程中基因是否进入受体细胞的检测技术。有别于分子杂交技术,DNA分子杂交技术是针对于DNA而言,分子杂交技术针对对象可以是DNA也可以是RNA。
DNA分子杂交技术在分子生物学领域中已广泛地使用于克隆基因的筛选、酶切图谱的制作、基因组中特定基因序列的定性、定量检测和疾病的诊断等方面。

扩展资料:
基因组DNA探针的获得有赖于分子克隆技术的发展和应用。要得到一种特异性DNA探针,常常是比较烦琐的。以细菌为例,细菌的基因组大小约为5×106碱基,约含3000个基因。要获得某细菌特异的核酸探针,通常要采取建立细菌基因组DNA文库的办法。
即将细菌DNA切成小片段后(如用限制性内切酶做不完全水解)分别克隆得到包含基因组的全信息的克隆库,然后用多种其他菌种的DNA探针来筛选,产生杂交信号的克隆被剔除,最后剩下的不与任何其他细菌杂交的克隆则可能含有该细菌特异性DNA片段。
参考资料来源:
百度百科——DNA探针
百度百科—— DNA分子杂交技术

DNA分子杂交

DNA分子杂交技术:一种对基因工程中基因是否进入受体细胞的检测技术。此概念有别于分子杂交技术,DNA分子杂交技术是针对于DNA而言,分子杂交技术针对对象可以是DNA也可以是RNA。

核酸分子杂交具有很高的灵敏度和高度的特异性,因而该技术在分子生物学领域中已广泛地使用于克隆基因的筛选、酶切图谱的制作、基因组中特定基因序列的定性、定量检测和疾病的诊断等方面。

因而它不仅在分子生物学领域中具有广泛地应用,而且在临床诊断上的应用也日趋增多。 利用DNA探针还可以用于环境监测,如检测饮用水中病毒的含量。此法更快速、灵敏。

扩展资料:

核酸分子杂交作为一项基本技术,已应用于核酸结构与功能研究的各个方面。核酸分子杂交具有很高的灵敏度和高度的特异性,因而该技术在分子生物学领域中已广泛地使用于克隆基因的筛选、酶切图谱的制作、基因组中特定基因序列的定性、定量检测和疾病的诊断等方面。

因而它不仅在分子生物学领域中具有广泛地应用,而且在临床诊断上的应用也日趋增多。在医学上,目前已用于多种遗传性疾病的基因诊断(gene diagnosis),恶性肿瘤的基因分析,传染病病原体的检测等领域中,其成果大大促进了现代医学的进步和发展。

基因工程第三步目的基因的鉴定中:

1、鉴定目的基因是否整合到染色体DNA上:DNA-DNA分子杂交。

2、鉴定目的基因是否准确表达蛋白质:RNA-DNA分子杂交或抗原-抗体杂交。

参考资料来源:百度百科——DNA分子杂交技术



DNA分子杂交技术又称DNA探针技术,是利用DNA分子的变性、复性以及碱基互补配对的高度精确性,对某一特异性DNA序列进行探查的新技术。
DNA分子杂交技术的原理 :
DNA分子杂交的原理是,具有互补碱基序列的DNA分子,可以通过碱基对之间形成氢键等,形成稳定的双链区。在进行DNA分子杂交前,先要将两种生物的DNA分子从细胞中提取出来,再通过加热或提高pH的方法,将双链DNA分子分离成为单链,这个过程称为变性。然后,将两种生物的DNA单链放在一起杂交,其中一种生物的DNA单链事先用同位素进行标记。如果两种生物DNA分子之间存在互补的部分,就能形成双链区。由于同位素被检出的灵敏度高,即使两种生物DNA分子之间形成百万分之一的双链区,也能够被检出。
3、DNA分子杂交技术的工具 ------ DNA探针
DNA探针是利用放射性同位素(如32P)、荧光分子等标记的特定DNA片断,该片断可大至寄生虫基因组DNA,小至20个碱基。DNA探针具有特异性;由于用放射性同位素(如32P)或生物素标记探针,使杂交试验同时具有高度的敏感性。 4、DNA分子杂交技术的应用 :
(1) 不同种生物之间亲缘关系的判断
不同种生物之间亲缘关系的判断,常采用比较不同生物DNA分子差异来进行,常用DNA分子杂交法。将两种生物的DNA分子单链放在一起,如果这两个单链具有互补的碱基序列,就会形成杂合双链区。互补的碱基序列越多,形成的杂合双链区就越多,说明两种生物间的亲缘关系就越近(如图)。或者是把两个物种的DNA单链融合在一起,然后对这条新的DNA加热。两个物种DNA序列的相似程度越高,让这条DNA双链解开的温度也就越高。用这种方法,科学家推测出黑猩猩和人的DNA相似程度是大约98.5%,黑猩猩是与人类亲缘关系最近的动物。
(2) 基因诊断
基因诊断是上世纪70年代末迅速发展一项诊断技术,不仅及时推广应用于临床,并且也很快的被公安部门采用来侦破刑事案件。基因诊断是利用DNA分子杂交等分子学技术直接探查人体基因组DNA存在的缺损或基因表达产物的异常以及患病毒、细菌、寄生虫、真菌等感梁性疾病时,病原体的基因组织或其基因的表达产物作出迅速正确诊断;并取量相微。病毒,细菌等原体得入人体内后需要潜伏一定时间才能出现显示症状,因此采用通常形态学、生化学或血清方法诊断很难及时诊断出来,往往延迟了有效的治疗时间;只有基因诊断技术才能做到病原体尚没有出现症状前,就能作出准确的诊断。基因诊断是用放射性同位素(如32P)、荧光分子等标记的DNA分子做探针,利用DNA分子杂交原理,鉴定被检测标本上的遗传信息,达到检测疾病的目的。例如,利用DNA 探针可以迅速地检出肝炎患者的病毒,为肝炎的诊断提供了一种快速简便的方法。目前用基因诊断方法已经能够检测出肠道病毒、单纯疱疹病毒等许多种病毒。目前核酸分子杂交不但用来检测急性病人标本中的病毒DNA,也用于检测不易分离培养的慢性感染、潜伏感染、整合感染病人标本中的病毒DNA。
(3)环境监测。
据报道,用DNA探针可以检测饮用水中病毒的含量。具体的方法是使用一个特定的DNA片段制成探针,与被检测的病毒DNA杂交,从而把病毒检测出来。此方法的特点是快速、灵敏。用传统方法进行检测,一次需要耗费几天或几个星期的时间,精确度也不高。用DNA探针只需要花费一天的时间,并且能够大幅度地提高检测精度。

就是DNA单链之间通过碱基互补配对形成双链。其实这两条链不是完全的互补也可以杂交的,对于高中的学生就不需要知道太多了,大学里学生物专业你就会知道高中的东西特别浅显,或者是不完整的。

所谓杂交,顾名思义,是两条来源不同的DNA 链使用dna探针技术按照碱基互补配对原则结合成一条新的双链。分为变性复性两个过程。杂交的方法有很多,可以在溶液中,也可以在滤膜上。经典方法叫做Southern杂交,是DNA 杂交,还有一种northern 杂交是RNA

DNA分子杂交的基础是,具有互补碱基序列的DNA分子,可以通过碱基对之间形成氢键等,形成稳定的双链区。提取DNA分子,通过加热或提高pH,双链DNA分子成为单链(变性),两种DNA单链放在一起。互补的部分形成双链区。



(编辑:袁功承)
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