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分子生物学实验中使用试剂有哪些要求

来源:www.zuowenzhai.com    作者:编辑   日期:2024-05-31
分子生物学实验包括哪些实验呢?试验中常用的试剂盒有哪些?常用什么来完成实验?

各个学校用的书不一样,我们是老师自己整理的,有《基因组提取》《DNA电泳分析》《目的基因的克隆》《质粒的提取》《PCR扩增和产物检测》

LB/TB培养基
枪头
EP管

分子生物学实验常用试剂配置

100mmol/L PMSF:溶解174mg的PMSF(苯甲基磺酰氟)于足量的异丙醇中,定容到10ml。分成小份并用铝箔将装液管包裹 或贮存于-20℃。
20mg/ml蛋白酶K(proteinase K):将200mg的蛋白酶L加入到9.5ml水中,轻轻摇动,直至蛋白酶K完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。
10mg/mlRnase(无DNase)(DNase-free RNase):溶解10mg的胰蛋白RNA酶于1ml的10mmol/L的乙酸钠水溶液中(pH 5.0)。溶解后于水浴中煮沸15min,使DNA酶失活。用1mol/L的Tris-HCl调pH至7.5,于-20℃贮存。(配制过程中要戴手套)
5mol/L氯化钠(NaCl):溶解29.2g氯化钠于足量的水中,定容至100ml。
10N氢氧化钠(NaOH):溶解400g氢氧化钠颗粒于约0.9L水的烧杯中(磁力搅拌器搅拌),氢氧化钠完全溶解后用水定容至1L。
10%SDS(十二烷基硫酸钠):称取100gSDS慢慢转移到约含0.9L的水的烧杯中,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。用水定容至1L。
2mol/L山梨(糖)醇(Sorbitol):溶解36.4g山梨(糖)醇于足量水中使终体积为100ml。
100%三氯乙酸(TCA):在装有500gTCA的试剂瓶中加入100ml水,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。(稀释液应在临用前配制)


17567846470分子生物学实验中使用试剂有哪些要求
诸柄梅答:分子生物学实验常用试剂配置 100mmol/L PMSF:溶解174mg的PMSF(苯甲基磺酰氟)于足量的异丙醇中,定容到10ml。分成小份并用铝箔将装液管包裹 或贮存于-20℃。20mg/ml蛋白酶K(proteinase K):将200mg的蛋白酶L加入到9.5ml水中,轻轻摇动,直至蛋白酶K完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到10ml,然...

17567846470细胞生物学实验的基本要求有哪些?
诸柄梅答:试剂:乙醇、冰醋酸(纯乙酸)、乙酸钠、硫代硫酸钠、硝酸银、碳酸钠、甘氨酸或 EDTA. Na2.2H2O、甲醛。

17567846470Lipo3000的正确使用方法是什么?
诸柄梅答:在开始转染之前,你需要准备的材料包括:你的质粒、无菌EP管,以及不可或缺的Opti-MEM培养基。Opti-MEM的特性和纯净度对于转染效果至关重要。推荐转染方案 建议在细胞融合率达到70-90%时进行转染,这样能确保最佳的效率。对于转染试剂的用量,推荐直接使用5微升,既经济又精准。siRNA转染小贴士 令人惊喜的...

17567846470分子生物学实验基本操作规程
诸柄梅答:在进行分子生物学实验过程中,需要一个清洁的实验环境,所使用的器皿及溶液均需要进行除(灭)菌处理,一方面避免环境中微生物的污染,另一方面还可消除蛋白酶和核酸酶对实验的干扰和影响。在进行微生物及细胞的纯培养时要求更高,不能有任何外来杂菌。因此,对所有器材、培养基要进行严格灭菌,对工作场所进行消毒,保证工作顺...

17567846470求分子生物学实验讲义
诸柄梅答:3.超纯水:用蒸馏水、离子交换水、反渗透纯水做为供水,磁铁耦合齿轮泵作用使水循环。用于PCR、PCR氨基酸分析、DNA测序、酶反应、组织和细胞培养等。(三)菌消毒设备:分子生物学所用大部分试剂,而且实验用具都应严格消毒灭菌。。1.蒸汽消毒锅:用于小批量物品的随时消毒。大批实验物品、试剂、培养基可使用大型消毒且...

17567846470高中生物中需要现配现用的试剂有哪些?
诸柄梅答:1、斐林试剂 斐林试剂甲和斐林试剂乙混合后会因酒石酸有一定的还原性而自发地缓慢产生氧化亚铜沉淀,因此斐林试剂一般为现用现配。2、双缩脲试剂 双缩脲试剂A是质量分数为0.1 g/mL的NaOH水溶液;双缩脲试剂B是质量分数为0.01 g/mL的CuSO4水溶液。先在待测液中加入双缩脲试剂A 3mL,振荡均匀...

17567846470高中生物中实验试剂一共有哪些,其对应的实验是什么,实验中有哪些要注意...
诸柄梅答:1.斐林试剂:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.05g/ml CuSO4(乙液)。用法:将斐林试剂甲液和乙液混合,再将混合后的斐林试剂倒入待测液,水浴加热,如待测液中存在还原糖,则呈砖红色。2.班氏糖定性试剂:为蓝色溶液。和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红色沉淀。用于尿糖的测定。3.双缩脲试剂:...

17567846470请问分子生物学实验室一般有哪些注意事项?
诸柄梅答:很多试剂是有毒的 1,进行核酸电泳的地方 有EB,强致癌 2,蛋白电泳的地方 有丙烯酰胺,神经毒剂 两个东西都是通过皮肤吸收 要小心

17567846470关于细胞生物学实验的问题!!!
诸柄梅答:Schiff试剂的质量:在做Feulgen反应时,重要的因素就是Schiff试剂的质量问题.实验时,要注意试剂颜色是否正常,有无SO2的气味.洗涤剂的重要性:漂洗时,所用的亚硫酸水,最好在每次实验前临时配制,以便保持较浓的SO2.实验对照组:一定要做对照片,以便说明实验结果的真实性.操作过程中,用镊子镊取根尖的生长区部位,切勿夹...

17567846470做分子生物研发的实验室,需要哪种试剂管理?
诸柄梅答:(1)能否真正落实试剂(化学品)的全生命周期管理理念并提供足够精细化管理模式,实现每瓶试剂从采购、入库、申领、出库、退库、报废等全程动态实时追踪;(2)能否提供一整套专业的实验室危化品管理解决方案,涉及危化品的领用审批、安全存储(遵循配存禁忌原则)、安全使用(试剂安全信息提醒/化学品安全...


(编辑:屈泥仇)
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