生物实验:血红蛋白的提取和分离
蛋白质的提取和分离一般分为四步:
(1)样品处理:包括洗涤红细胞;血红蛋白稀释;离心等操作收集到的血红蛋白溶液。
(2)粗分离:透析除去分子较小的杂质。
(3)纯化:通过凝胶色谱法将分子量较大的杂质蛋白质除去。
(4)纯度鉴定:通过聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定。
(一)样品处理
1、红细胞的洗涤:
目的是去除杂蛋白。要加入柠檬酸钠防止血液凝固;离心将血液分层,用胶头吸管吸出黄色血浆;用生理盐水洗涤。
2、血红蛋白的释放:
在蒸馏水和甲苯作用下,红细胞破裂释放
3、分离血红蛋白溶液:
离心分层;滤纸过滤去除脂溶性沉淀层;分液漏斗分出红色透明液体。
4、透析:
装入透析袋并置于磷酸缓冲液中(PH为7.0)透析。
15177043931:...血红蛋白完成的.血红蛋白的主要功能是携带O2或CO2.我们
燕隶牧
:答:(1)血红蛋白的提取和分离一般分为4步:样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定.(2)①采取血液时要在采血容器中预先加入柠檬酸钠以防止血液凝固.②样品处理又包括红细胞洗涤、血红蛋白释放、分离血红蛋白溶液和透析4步.(3)①透析即是血红蛋白的粗分离,透析的目的是除去分子量较小的杂蛋白.②透析的...
15177043931:...脊椎动物的血液进行实验,来提取和分离血红蛋白.请回答下列有关问题...
燕隶牧
:答:解;(1)血红蛋白的提取和分离实验中透析、凝胶色谱柱装填、洗脱样品和电泳用到磷酸缓冲液,共4次;在血红蛋白的释放过程中用到蒸馏水,共1次.(2)红细胞洗涤过程中用生理盐水洗涤,若用蒸馏水会使红细胞吸水涨破提前释放血红蛋白.(3)透析的原理是透析袋是半透膜,能使小分子自由进出而将大分子...
15177043931:...脊椎动物的血液进行实验,来提取和分离血红蛋白,
燕隶牧
:答:①血红蛋白的提取和分离过程中的样品处理阶段包括红细胞的洗涤、血红蛋白的释放和分离血红蛋白溶液.②血红蛋白溶液的粗分离采用的方法是透析,即将集的血红蛋白溶液放在透析袋中进行透析,去掉分子量较小的杂质,原理是小分子杂质可以通过透析袋进入缓冲液中,血红蛋白分子量较大,不能通过透析袋进入缓冲溶液...
15177043931:生物实验:血红蛋白的提取和分离
燕隶牧
:答:蛋白质的提取和分离一般分为四步:(1)样品处理:包括洗涤红细胞;血红蛋白稀释;离心等操作收集到的血红蛋白溶液。(2)粗分离:透析除去分子较小的杂质。(3)纯化:通过凝胶色谱法将分子量较大的杂质蛋白质除去。(4)纯度鉴定:通过聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定。(一)样品处理 1、红细胞的洗涤:目的是去除杂蛋...
15177043931:血红蛋白粗分离的方法提纯的方法
燕隶牧
:答:(1)血红蛋白的提取和分离的实验方法是凝胶色谱法;(2)血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有:样品处理:①红细胞的洗涤;②血红蛋白的释放;③分离血红蛋白溶液.粗分离:①分离血红蛋白溶液;②透析.纯化:调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质.纯度鉴定:SDS聚丙烯...
15177043931:下列是有关血红蛋白提取和分离的相关操作,其中正确的是( )A.透析可去...
燕隶牧
:答:透析12h.透析可以去除样品中分子量较小的杂质,A正确;B、洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白,加入五倍体积的生理盐水.B错误;C、低速短时间离心是分离红细胞,在蒸馏水和甲苯作用下,红细胞破裂释放出血红蛋白.C错误;D、红色的蛋白质接近色谱柱底端时,开始收集流出液,D错误.故选:A ...
15177043931:(1)为了提取和分离血红蛋白,首先对红细胞进行洗涤以去除杂质蛋白,洗涤...
燕隶牧
:答:(1)提取和分离血红蛋白的操作中,红细胞的洗涤需要用生理盐水,生理盐水是红细胞的等渗溶液,红细胞不会变形,如果用蒸馏水红细胞会通过渗透作用吸水涨破.(2)除去小分子杂质的方法是透析,小分子物质可以透过透性袋进入烧杯而大分子血红蛋白保留在透性袋内,透析液是(磷酸)缓冲液;由于透性袋是...
15177043931:血红蛋白的提取和分离
燕隶牧
:答:1.样品处理:洗涤,用生理盐水洗涤,低速离心,直至上清液中没有黄色 2.血红蛋白释放:加入蒸馏水和甲苯,细胞破碎释放血红蛋白 3.分离:低速离心,分成4层,第三层红色透明液体为血红蛋白水溶液层,分出该层 4.透析:放入透析袋,出去分子量较小的杂质 5.过凝胶色谱柱收集纯蛋白 6.SDS-PAGE检测 ...
15177043931:红细胞中血红蛋白的提取和分离步骤
燕隶牧
:答:血红蛋白提取和分离的程序可分为四大步,包括:样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定.首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集到血红蛋白溶液,即样品的处理;再经过透析去除分子量较小的杂质,即样品的粗分离;然后通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去,即样品的纯化;最后经聚丙烯酰胺凝胶...
15177043931:血红蛋白的提取和分离
燕隶牧
:答:1.确保血红蛋白所处环境的PH值稳定。2.确保洗脱血红蛋白要充分,一致,即红色带移动均匀一致,且不能出现气泡。3.有机溶剂 萃取法