ELISA试验包被抗原中加入BSA对包被有影响吗

可以的，病毒本身是大分子，可以包被在板子上。

　elisa抗原包被和抗体包被的区别 （一）包被用抗原 　　用于包被固相载体的抗原按其来源不同可分为天然抗原、重组抗原和合成多肽抗原三大类。天然抗原可取自动物组织、微生物培养物等，须经提取纯化才能作包被用。如HBsAg可以从携带者的血清中提取，一般的细菌和病毒抗原可以从其培养物中提取，蛋白成份抗原可从富含此抗原的材料中提取等（例如AFP从脐带血或胎肝中提取）。重组抗原是抗原基因在质粒体中表达的蛋白质抗原，多以大肠杆菌或酵母菌为质粒体。重组抗原的优点是除工程菌成份外，其他杂质少，而且无传染性，但纯化技术难度较大。以大肠杆菌为质粒体的重组抗原如不能充分除大肠杆菌成份，用于ELISA试剂盒，在反应中可出现假阳性，因不少受检者受大肠杆菌感染而在血清中存在抗大肠杆菌抗体。重组抗原的另一特点是能用基因工程制备某些无法从天然材料中分离的抗原物质。例如丙型肝炎病毒（HCV）尚不能培养成功，而且丙肝病人血清中HCV抗原含量极微。目前检测抗HCVELISA中所用包被抗原大多为根据HCV的基因克隆表达而制备的重组抗原。在传染病诊断中，不少重组抗原如HBsAg、HBeAg和HIV抗原等均在ELISA中取得应用。合成多肽抗原是根据蛋白质抗原分子的某一抗原决定簇的氨基酸序列人工合成的多肽片段。多肽抗原一般只含有一个抗原决定簇，纯度高，特异性也高，但由于分子量太小，往往难于直接吸附于固相上。多肽抗原的包被一般需先使其与无关蛋白质如牛血清白蛋白质（BSA）等偶联，借助于偶联物与固相载体的吸附，间接地结合到固相载体表面。应用多肽抗原的另一注意点为他仅能检测与其相应的抗体。一种蛋白质抗原往往含有多个不同的能引起抗体产生的决定簇，因此在受检血清中的其他抗体就不能与该多肽抗原发生反应。另外，某些微生物发生变异时往往发生抗原结构变化，在这种情况下，用个别多肽抗原进行包被可引起其他抗体的漏检。 　　（二）ELISA试剂盒包被用抗体 　　包被固相载体的抗体应具有高亲和力和高特异性，可取材于抗血清或含单克隆抗体的腹水或培养液。如免疫用抗原中含有杂质（即便是极微量的），在抗血清中将出现杂抗体，必须除去（可用吸收法）后才能用于ELISA，以保证试验的特异性。抗血清不能直接用于包被，应先提取IgG，通常采用硫酸铵盐析和Sephadex凝胶过滤法。一般经硫酸铵盐析粗提的IgG已可用于包被，高度纯化的IgG性质不稳定。如需用高亲和力的抗体包被以提高试验的敏感性，则可采用亲和层析法以除去抗血清中含量较多的非特异性IgG。腹水中单抗的浓度较高，特异性亦较强，因此不需要作吸收和亲和层析处理，一般可将腹水作适当稀释后直接包被，必要时也可用纯化的IgG。应用单抗包被时应注意，一种单抗仅针对一种抗原决定簇，在某些情况下，用多种单抗混合包被，可取得更好的效果。

19591204309：ELISA试验包被抗原中加入BSA对包被有影响吗
狄茜悦 ：答：重配吧,这个肯定有影响的,不可以用的.包被抗原中的抗原量很少,相对于BSA来说是微量的.这样板子上吸附的都是BSA,而抗原吸附的很少或者没有.后期实验肯定失败.除非你BSA加入特别少(不小心滴了一点点进去),相对于抗原来说都少.这样影响就会少一些....

19591204309：生物素亲和系统可以用bsa封闭吗
狄茜悦 ：答：抗原或抗体包被时所用的浓度较低.05%-0。包被好的E LISA 板干燥后放入密封袋或锡袋中，封闭就是让大量不相关的蛋白质充填这些空隙，因其中大量非抗体蛋白在包被时同样也吸附在固相表面，从而排斥在ELISA 其后的步骤中干扰物质的再吸附。但在间接法测定中; ，因此在试剂盒的制备中较少应用; ，在低温...

19591204309：ipwashbuffer怎么配
狄茜悦 ：答：重配吧。这个肯定有影响的，不可以用的。包被抗原中的抗原量很少，相对于BSA来说是微量的。这样板子上吸附的都是BSA，而抗原吸附的很少或者没有。后期实验肯定失败。除非你BSA加入特别少（不小心滴了一点点进去），相对于抗原来说都少。这样影响就会少一些。

19591204309：求封闭液中1%的BSA是怎么配制??
狄茜悦 ：答：取1g BSA，加蒸馏水，定容到100ml就行了。最常用的封闭剂是0.05%-0.5%的BSA，封闭是否必要，取决于ELISA的模式及具体的实验条件。并非所有的ELISA 固相均需封闭，封闭不当反而会使阴性本底增高。一般说来，双抗体夹心法，只要酶标记物是高活性的，操作时洗涤彻底，不经封闭也可得到满意的结果。特别...

19591204309：软骨藻酸的检测方法
狄茜悦 ：答：将ELISA应用于DA的检测中,利用原-抗体反应,采用特异性贝类毒素的抗体来检测DA。 Yu等采用匙孔血蓝蛋白(KLH)和小牛血清蛋白(BSA)为载体,进行直接酶联免疫测定,结果表明,蓝贻贝样品的检测限<25ng/g,回收率为81.1%,Yu等还将实验结果用HPLC方法进行了验证,最终发现15种被污染的贝类样品中有10种样品的DA含量<50ng...

19591204309：免疫学中与抗原偶联的载体蛋白的选择原则
狄茜悦 ：答：载体表面应首先应具有化学活性基团,这些基团可以直接与抗生素或农药分子偶联,这是化学偶联制备抗原的前提;其次,载体应具备一定的容量,可以偶联足够的分子;载体还应该是惰性的,不应干扰偶联分子的功能;而且载体应具有足够的稳定性,且应该是廉价易得的。常用来作为合**工抗原的载体蛋白质有牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白...

19591204309：免疫染色中加入staining buffer(成分有血清和吐温)目的是为了封闭,但 ...
狄茜悦 ：答：封闭是封闭住板（或者叫空），一开始是包被，包被以后，板子仍然可以和其他的蛋白结合，比如你的一抗或者二抗，或者是要检测的抗原，而用血清（BSA,或者脱脂乳）封闭后，整个板子的空白处都可以被封闭，不能再继续结合其他的蛋白了。而封闭物不会和你的待检蛋白结合，只有你包被上的单抗（或者已知抗原...

19591204309：酶标板包被
狄茜悦 ：答：5）封闭后加的东西取决于试验方法；间接法一般是抗体，双抗夹心法一般是抗原。5.)Na2CO3 NaHCO3是配制碳酸盐缓冲液的一对缓冲试剂， NaN3是防腐作用。封闭液的作用是封闭非特性吸附位点。一般含有动物血清或BSA.包被即可能是抗原也可能是抗体，看你要测什么，选什么方法。

19591204309：elisa抗原包被和抗体包被的区别
狄茜悦 ：答：（二）ELISA试剂盒包被用抗体 包被固相载体的抗体应具有高亲和力和高特异性，可取材于抗血清或含单克隆抗体的腹水或培养液。如免疫用抗原中含有杂质（即便是极微量的），在抗血清中将出现杂抗体，必须除去（可用吸收法）后才能用于ELISA，以保证试验的特异性。抗血清不能直接用于包被，应先提取IgG，通常...

19591204309：做间接elisa时,以不同的抗原浓度包被,od值基本无变化
狄茜悦 ：答：包被抗原浓度过大，抗原浓度可试着再往下稀释；如0ug/ml测出的OD值与其它浓度差不多，理论上说应该存在非特异反应 包被抗原浓度的选择：可通过棋盘滴定法进行测定，但用单项滴定法更为简便，其方法是将抗原进行一系列稀释包被微量反应板，再用一定稀释度的阳性参考血清和阴性参考血清进行孵育后洗涤，再加...