免疫组化bsa封闭原理
...我的步骤是PFA固定15min,PBS洗三次,BSA封闭2h,孵育一抗过夜_百度...
：答：冰冻切片的免疫组化染色步骤 速冻组织 将组织块平放于软塑料盖或特制小盒内（直径2cm），如组织块小可适量加OCT包埋剂浸没组织，然后将特制小盒缓缓平放入盛有液氮的小杯内，当盒底部接触液氮时即开始气化沸腾，此时小盒保持原位切勿浸入液氮内，大约10-20秒组织即迅速冰冻成块。取出组织冰块立即置入-80...
做免疫组化都需要哪些试剂
：答：7、抗原修复液：枸橼酸缓冲液（pH6.0）；8、活化剂：EDTA或者Triton X-100；9、1%~10%牛血清清蛋白（BSA）封闭液；10、H2O2，灭活内源性过氧化物酶；11、显色液：根据你做的酶来选择，如果是HRP就用DAB，如果是AKP，就用NBT/BCIP，免疫荧光则不需要；12、50%缓冲甘油封片液。
细胞爬片的制作方法
：答：1.） 冷丙酮，可用于一般的免疫组化染色。将纯的丙酮预先放入冰箱-20℃后便为冷丙酮，加入冷丙酮于-20℃（丙酮有很强的挥发性，注意将含有丙酮和爬片的器皿盖严，防止其挥发）固定10分钟。取出后，室温吹干，然后放入-20℃保存。2. ）多聚甲醛(常用4%)：可用于免疫电镜；也可用于免疫荧光以及TUNEL...
求免疫组化冰冻切片荧光染色具体流程
：答：当压力锅开始慢慢喷气时(约加热5~6分钟后),计时1~2分钟,然后将压力锅端离热源,冷水冲至室温后,取下气阀,打开锅盖,取出切片,蒸馏水洗后,PBS洗2分钟×3,下接免疫组化染色步骤。3.3 石蜡切片电炉煮沸抗原修复操作方法:切片脱蜡至水后,放入盛有枸橼酸盐缓冲液(工作液)的容器中,并将此容器置于盛有一定数量自来水...
请问有谁知道核酸引物和探针PAGE纯化的步骤???
：答：⑥ 用底物显色、复染、脱水、封片,按免疫组化常规法进行。说明:(1)用不同浓度和不同温度的盐溶液洗涤是为了去除探针与不完全同源序列杂交,减少非特异性显色,其原则盐浓度由高到低,温度由低到高洗涤,洗涤过程中切勿使切片干燥。 (2)应该有阳性和阴性对照,阳性对照:用该探针与已知含互补序列的组织细胞标本进行...
Western blot 实验技术及常见问题分析?
：答：②两种实验的一抗有时候不能通用,公司的产品说明一般都会说明可以进行什么实验,在免疫组化时,是否适合石蜡切片或者冰冻切片。 5 细胞水平要做western blot,多少细胞提的蛋白够做western blot? 答:一般5×106就足够了。 6 同一样品能同时提RNA又提蛋白么?这样对western blot有无影响? 答:能,没有问题。 7同一...
2%BSA做免疫组化怎样配置
：答：2gBSA加100ml的水
石蜡免疫组化买回来的抗体原液如何稀释?要稀释1:50和1:200两种,能用市...
：答：IHC 一抗稀释比例可以参考说明书,抗体稀释液的成分都大同小异,主要就是BSA+PBS/TBS,所以一般的抗体稀释液就能用了。 本回答由提问者推荐 举报| 评论 3 0 iForevergen 采纳率:100% 擅长: 暂未定制 为您推荐: 免疫组化是什么意思 免疫组化结果怎么看 免疫组化多少钱 免疫组化可以是良性吗 免疫组化和...
贺馥俗: ： 抗体除了会和抗原特异性结合,还会由于静电吸附及其他非特异性反应结合在其他位置上,加BSA——就是先加一种蛋白质去可能会和抗体非特异性结合的位点结合先,这个时候在家一抗不就...
终璧蓝18311965135： 求封闭液中1%的BSA是怎么配制?? -
贺馥俗: ： 取1g BSA,加蒸馏水,定容到100ml就行了. 最常用的封闭剂是0.05%-0.5%的BSA,封闭是否必要,取决于ELISA的模式及具体的实验条件.并非所有的ELISA 固相均需封闭,封闭不当反而会使阴性本底增高. 一般说来,双抗体夹心法,只要...
终璧蓝18311965135： 免疫组化一抗是山羊来源的该用什么封闭液 -
贺馥俗: ： 封闭是血清与非特异性位点结合,以消除非特异性染色,提高目的蛋白的准确性和降低背景.并非所有的免疫组化都由山羊血清封闭,因为一般二抗是羊抗X,所以采用山羊血清,其与使用二抗来源有关.
终璧蓝18311965135： 什么叫免疫组化 -
贺馥俗: ： 是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry).
终璧蓝18311965135： 求助:免疫组化两步法的介绍与详细步骤 -
贺馥俗: ： 免疫组化实验程序目前比较常用的有两个:三步法和二步法.前者在较长时间内一直是免疫组化的标准程序,目前该法仍在使用.后者是近年来(1995年)推出的灵敏度比较高的方法,操作较三步法便捷,但价格也高于前者.其原理是将传统三步法中的二抗和附有酶的三抗由二步法中的二抗和酶的结合物所代替.即:抗原~一抗~二抗*酶复合物 其特点是灵敏度高、背景干净、简便快捷、可以省去三步法中血清封闭的步骤、具有更高的信号放大系统.至于详细步骤就要看你使用的试剂盒了.下面以多聚辣根过氧化物酶免疫组化检测试剂盒说明其特点和原理.
终璧蓝18311965135： 什么情况要做免疫组化 -
贺馥俗: ： 胰腺炎和胰腺癌区分需活检,当然症状不太一样,但如要确诊只能活检.免疫组化在临床工作的意义 近年来,随着免疫组织化学技术的发展和各种特异性抗体的出现,使许多疑难肿瘤得到了明确诊断.在常规肿瘤病理诊断中,5%-10%的病例单...
终璧蓝18311965135： 免疫组化的解释 请教专家 急!急!急! -
贺馥俗: ： 免疫组化的原理就是通过一些标记物找出肿瘤中表达而正常组织不会表达的蛋白质类物质.你上面所列的P63(+)、Ck8/18(+)就是p16和ck8两种免疫标记蛋白阳性,在送检的标本中有表达,D2-40(-)、Calretinin(-)、CgA(-)、Syn(-)就是阴性不表达,Ki-67(+10%)小部分表达.
终璧蓝18311965135： 谁知道ELISA,Western Blot,免疫组化 这三个比较有什么区别,越详细越好!谢谢了,我给加分 -
贺馥俗: ： 免疫组化 是融合了免疫学原理(抗原抗体特异性结合)和组织学技术(组织的取材、固定、包埋、切片、脱蜡、水化等),通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素)显色,来对组织(细胞)内抗原进行定位、定性...
终璧蓝18311965135： 免疫组化实验染色的注意事项及影响因素有哪些? -
贺馥俗: ： 免疫组化染色影响因素 影响免疫组化染色质量的因素有很多,在实验中应注意组织的取材和固定,选择质量好的商品化抗体,恰当地选择和使用封闭和抗原修复手段,严格的技术操作和对照等. 1.假阴性反应可发生在: 1) 组织内...
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