免疫荧光bsa封闭液配制
如何配制封闭液,怎么使用?
：答：1）常用封闭液为脱脂牛奶（光明或伊利等）、牛血清白蛋白（BSA）、无蛋白封闭液等 2) 封闭液浓度：封闭时一般用5%脱脂牛奶，也可用1-5%BSA或1%无蛋白封闭液；配制二抗稀释液一般为1-5%脱脂牛奶，全部用PBS稀释 3) 封闭时间：室温1-2h、4度过夜或37度半小时 4) 封闭液pH：一般5%脱脂牛奶pH大约为...
免疫荧光用什么封闭比较好
：答：BSA可以用来封闭，网上查到的浓度0．5％到2％都有，1％比较常见。孵育一抗之前要加，封闭孵育时间过后，加一抗之前不要洗掉，只移除多余液体即可．之后不需要再封闭，但是一抗和二抗都应该用含有BSA的缓冲液来稀释。有些人还加tween来减少非特异性结合。封闭抗原也可以使用二抗抗体所属动物种类的血清．...
荧光色染发操作方法
：答：7. 5%BSA室温封闭30分钟。8. 加一抗（用1%BSA稀释）放在湿盒里，4度过夜。9. 1×PBS洗3次，每次10分钟。10. 加二抗(用1%BSA稀释)30分钟，闭光。11. 1×PBS洗3次，每次10分钟。12. 95%甘油封片。注：4%甲醛，0.2%Triton，5%BSA均用1×PBS稀释。二、细胞爬片的免疫荧光步骤基本...
配制浓度7%的封闭液怎么配
：答：在装有200ml蒸馏水的瓶中加入数滴甲基橙指示剂，再加入10%硫酸溶液至橙红色即可。封闭液应封闭所有的未结合位点而不替换表面上的靶蛋白、不结合靶蛋白表位、也不与抗体或检测试剂有交叉反应。
骨组织免疫组化实验步骤(HRP-DAB法)
：答：4. 封闭 5%BSA封闭液 37℃ 30min， 甩干不洗。 5. 孵育一抗 TBS或PBS稀释一抗。4℃湿盒过夜。6. 孵育二抗 TBS 5min×5。 3%H 2 O 2 滴加于切片上，室温避光10min。 滴加聚合HRP标记二抗，37℃，30min。 TBS 5min×5。 7. DAB显色 依照DAB...
免疫荧光双标两种一抗可以一起加吗
：答：▷用PBST配置1%的BSA封闭液，将切片在封闭液中孵育1h ▷4℃冰箱，一抗过夜 ▷用枪吸走一抗液体，PBS溶液洗3次，每次5min ▷二抗室温1h ▷用枪吸走二抗液体，PBS溶液洗3次，每次5min（避光条件下进行）6)第二荧光标记 ▷4℃冰箱，一抗过夜 ▷用枪吸走...
western牛奶封闭液怎么配?
：答：1、 在酶切反应缓冲液中加入BSA，通过提高溶液中蛋白质的浓度，对酶起保护作用。防止酶的分解和非特异性吸附，能减轻有些酶的变性，减轻不利环境因素如加热，表面张力及化学因素引起的变性的。2 、ELISA中也常常用到，比如封闭液，样本稀释液，酶结合物稀释液都可以用BSA。3、生化研究，遗传工程和药物...
bsa封闭最长多久
：答：BSA封闭液在2-8℃的环境下可以封闭**24小时**。具体的封闭时间会依据实验而定，一般情况下，室温封闭半小时至1小时就可以进行抗体孵育等后续操作。
基质胶变性后还能用于细胞贴壁吗
：答：3.通透：加0.3%-0.5%Triton X-100(用1X的PBS稀释配制)，室温通透20-30min（如果是检测细胞膜上表达的抗原，则省略此步骤）。PBS清洗3次，3-5min/次。吸干PBS。4.封闭：在玻底培养皿中滴加正常血清或5%BSA封闭液，室温封闭30-60min；5.孵育一抗：吸掉封闭液，不用PBS洗，在每个玻底培养皿...
荧光原位杂交会用到哪些试剂?
：答：（8）DAPI/antifade溶液：用去离子水配制1mL/mg DAPI储存液，按体积比1:300，以antifade溶液稀释成工作液。（9）封闭液I：体积分数5% BSA 3 mL，20×SSC 1 mL，ddH2O 1mL，Tween20 5 μL混合。（10）封闭液II：体积分数5% BSA 3mL，20×SSC 1mL，goat serum 250 μL，ddH2O 750 μL，...
鲁菊洪: ： 取1g BSA,加蒸馏水,定容到100ml就行了. 最常用的封闭剂是0.05%-0.5%的BSA,封闭是否必要,取决于ELISA的模式及具体的实验条件.并非所有的ELISA 固相均需封闭,封闭不当反而会使阴性本底增高. 一般说来,双抗体夹心法,只要...
印莫青13199524742： 5%的BSA怎么配?5%的BSA怎么配
鲁菊洪: ： 高级商务秘书与行政助理:BSA(Business Secretary & Administration)摩根BSA(Business Secretary & Administration)证书是由全球摩根商务顾问依据摩根标准(...
印莫青13199524742： 免疫荧光用什么封闭比较好 -
鲁菊洪: ： BSA可以用来封闭,网上查到的浓度0.5%到2%都有,1%比较常见. 孵育一抗之前要加,封闭孵育时间过后,加一抗之前不要洗掉,只移除多余液体即可.之后不需要再封闭,但是一抗和二抗都应该用含有BSA的缓冲液来稀释.有些人还加tween来减少非特异性结合. 封闭抗原也可以使用二抗抗体所属动物种类的血清.没有统一固定的浓度要看情况. 用试剂盒则有自带的封闭试剂,效果更稳定有保障. 免疫染色实验一个重要特点就是最佳条件都是试出来的,每换一个抗体条件都可能需要调整.所以最好的办法是用生产商测试过的实验方法.写个邮件问一下,就这么简单.
印莫青13199524742： 免疫荧光抗体稀释浓度怎么定 -
鲁菊洪: ： 一抗浓度需要自己摸索,二抗浓度一般是1:50-100,说明书上应该有推荐浓度.请教荧光抗体的稀释液配制方法.
印莫青13199524742： 免疫荧光用什么血清封闭 -
鲁菊洪: ： 可以使用无蛋白封闭液 PW040 PW041 PW042, 血清封闭:组织切片上有剩余的位点可以与一抗非特异性结合,造成后续结果的假阳性;封闭血清一般是和二抗同一来源的,血清中动物自身的抗体,预先能和组织中有交叉反应的位点发生结合;也可以用小牛血清、BSA、羊血清等,但不能与一抗来源一致.
印莫青13199524742： 免疫荧光中如果要封闭抗原 是用BSA吗 多少浓度 在孵育一抗前 还是之后? -
鲁菊洪: ：大多数都用5%BSA,其实和二抗来源一致的血清都可以,在一抗孵育之前.中洪博元技术实验为您解答
印莫青13199524742： 做细胞免疫荧光实验时,穿透液的具体配方是? -
鲁菊洪: ： 不可逆的穿透:0.1-0.2 %Triton溶于PBS,穿透15min.后续洗涤时不需要加Triton可逆的穿透:0.1-0.2 %皂角苷溶于PBS,穿透30min,染色及洗涤过程均需要加相同浓度的皂角苷
印莫青13199524742： 细胞免疫荧光怎么封片 -
鲁菊洪: ： 细胞免疫荧光的详细操作步骤 1,取出细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里,PBS洗三遍.注意有的时候作的细胞爬片可能比较小,因此夹取的时候要小心. 2,4%多聚甲醛固定20分钟,PBS洗三遍. 3,0.2%Triton X 100通透10分钟,PBS洗三遍. 4, 与二抗相同宿主的血清封闭30分钟,PBS洗三遍. 5.,一抗4度湿盒内过夜,也可37度2小时,感觉前者效果好,PBS洗三遍. 6,二抗室温2小时,或者37度1半小时,PBS洗三遍. 7,最好用DAPI染核,然后直接照荧光片. 8,蒸馏水洗掉PBS,甘油封片,指甲油封片子的四周.
印莫青13199524742： 基质胶上怎样做细胞免疫荧光试验 -
鲁菊洪: ： 免疫荧光技术(Immunofluorescence technique )又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种.它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术. 操作步骤: 1.细胞铺板:将细胞以合适的密度(注意:一般情况下...
印莫青13199524742： 免疫荧光0.1%triton怎么配 -
鲁菊洪: ： 1. 先配制0.2M的缓冲液.然后称取99.9g溶液,加入0.1g Triton-100(这个要看它的浓度,此处是当成100%计算的).
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