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bsa封闭和牛奶封闭区别

来源:www.zuowenzhai.com   投稿:2024-06-12

bsa封闭最长多久
答:BSA封闭液在2-8℃的环境下可以封闭**24小时**。具体的封闭时间会依据实验而定,一般情况下,室温封闭半小时至1小时就可以进行抗体孵育等后续操作。

ELISA实验中什么叫封闭
答:封闭是在用抗原或抗体包被ELISA板后,为了避免ELISA板在后续反应中吸附其他大分子(抗原、抗体)而出现非特异性显色反应,用BSA、牛奶等将板上未结合的位点封闭起来的过程。

Western blot实验最常见的10个问题及解决方案
答:通常Tween-20作为一种非离子型表面活性剂,效果和SDS、BSA作用差不多。由于膜上结合的蛋白会因为一些去污剂而被代替,因此在封闭时可使用Tween20清除去污剂,而且浓度不要超过0.3%(0.05%效果最好),如果牛奶封闭效果不好可以提高吐温浓度。在WB洗液里的吐温是和BSA一样,对抗原抗体蛋白提供保护作用,...

Tween20是什么?
答:3. 在Western blot实验中,Tween-20的作用是清除去污剂,其浓度不应超过0.3%(0.05%效果最佳)。如果使用牛奶封闭效果不佳,可以适当提高Tween-20的浓度。在WB洗液中,Tween-20与BSA一样,为抗原抗体蛋白提供保护作用,并减少抗体对抗原的非特异性作用。此外,作为表面活性剂,Tween-20可用于洗脱未...

作为wb封闭剂的bsa是什么等级的
答:推荐用TBST进行稀释获得5%的牛奶封闭液(5g\/100mL)。 很多人的经验是:脱脂牛奶封闭后背景比较干净,而检测磷酸化蛋白则用BSA(因脱脂牛奶含有较多的磷酸化蛋白,会干扰的)9991

免疫组化中的BSA(牛血清白蛋白)介绍及作用
答:探索免疫组化的守护者:BSA的神秘世界与深远影响 在免疫组化实验的精密舞台上,牛血清白蛋白(BSA)如一位不可或缺的幕后英雄。作为最常用的封闭液,BSA以其卓越的特性在众多场景中展现其作用,避免了抗原抗体间的混淆,确保实验结果的纯净。BSA封闭液的魔法 固相载体的表面如同无数小孔,等待着BSA的...

western blot 封闭时什么时候用脱脂奶什么时候用BSA?
答:做磷酸化蛋白一般不用脱脂奶,因为脱脂奶中有磷酸化蛋白,会使背景加深。其他时候一般BSA和脱脂奶通用就好了 根据经验来说,如果strip液洗过的,用脱脂奶感觉封闭的好一点

Westernblot中Tween-20的作用是什么?应该怎么用
答:3. Tween-20用于清除去污剂,其浓度不应超过0.3%(0.05%效果最佳)。如果牛奶封闭效果不佳,可以考虑提高Tween-20的浓度。在WB洗液中,Tween-20与BSA一样,提供保护作用,同时由于其表面活性剂的特性(司盘加成亲水的环氧乙烷基团后的化合物),可以减少抗体对抗原的非特异性作用,主要用于洗脱未结合的...

...buffer(成分有血清和吐温)目的是为了封闭,但是具体是封闭什么...
答:封闭是封闭住板(或者叫空),一开始是包被,包被以后,板子仍然可以和其他的蛋白结合,比如你的一抗或者二抗,或者是要检测的抗原,而用血清(BSA,或者脱脂乳)封闭后,整个板子的空白处都可以被封闭,不能再继续结合其他的蛋白了。而封闭物不会和你的待检蛋白结合,只有你包被上的单抗(或者已知抗原...

做Western blot时,用牛奶封闭的目的
答:一般使用脱脂牛奶来封闭,目的是要将除目的蛋白外其他无结合蛋白位置封闭起来,防止后面一抗非特异性结合产生较深背景。

鬱伦顾15530905038:    免疫荧光用什么封闭比较好 -
赵炎发:      : BSA可以用来封闭,网上查到的浓度0.5%到2%都有,1%比较常见. 孵育一抗之前要加,封闭孵育时间过后,加一抗之前不要洗掉,只移除多余液体即可.之后不需要再封闭,但是一抗和二抗都应该用含有BSA的缓冲液来稀释.有些人还加tween来减少非特异性结合. 封闭抗原也可以使用二抗抗体所属动物种类的血清.没有统一固定的浓度要看情况. 用试剂盒则有自带的封闭试剂,效果更稳定有保障. 免疫染色实验一个重要特点就是最佳条件都是试出来的,每换一个抗体条件都可能需要调整.所以最好的办法是用生产商测试过的实验方法.写个邮件问一下,就这么简单.

鬱伦顾15530905038:    ELISA实验中什么叫封闭 -
赵炎发:      : 封闭是在用抗原或抗体包被ELISA板后,为了避免ELISA板在后续反应中吸附其他大分子(抗原、抗体)而出现非特异性显色反应,用BSA、牛奶等将板上未结合的位点封闭起来的过程.

鬱伦顾15530905038:    WB封闭液与一抗稀释液一定要一致吗 -
赵炎发:      : 要一致.用牛奶封闭就用牛奶稀释,BSA封闭就BSA稀释.高保真生物技术有限公司,实验整体外包服务商.you can contact me, Q :four zero six zero eight eight four six three

鬱伦顾15530905038:    求封闭液中1%的BSA是怎么配制?? -
赵炎发:      : 取1g BSA,加蒸馏水,定容到100ml就行了. 最常用的封闭剂是0.05%-0.5%的BSA,封闭是否必要,取决于ELISA的模式及具体的实验条件.并非所有的ELISA 固相均需封闭,封闭不当反而会使阴性本底增高. 一般说来,双抗体夹心法,只要...

鬱伦顾15530905038:    蔗糖可以做封闭液吗 -
赵炎发:      : 1、ELISA实验中,蔗糖本身没有封闭作用;2、封闭液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等.3、加蔗糖的主要目的是保护ELISA板子吸附(包被)的蛋白,起到“保护剂”的作用.4、蔗糖溶液一般在ELISA板子经过BSA封闭后加,当然也有将蔗糖加到封闭液中同时进行处理;那一种更好需要你实验后来验证.但多数选择前者.

鬱伦顾15530905038:    ELISA实验,1%BSA封闭液和稀释液用水溶和pbs溶一般有区别吗 -
赵炎发:      : 封闭不当反而会使阴性本底增高,操作时洗涤彻底,取决于 ELISA 的模式及具体的实验条件,业已起到了类似封闭剂的作用.5%的牛血清白蛋白,封闭一般是不可少的(见2,而且封闭后的载体不易长期保存,吸收后固相载体表面尚有未被占据...

鬱伦顾15530905038:    southern blot 牛奶封闭液如何配置 -
赵炎发:      : Southern Blot 为什么要配牛奶封闭液啊?是最后孵育的一部要加抗体吗?如果是封闭抗体的话,一般就配5%的脱脂奶粉,5%多半指的是个g/100ml.也就是5g奶粉,100ml水的比例,完全溶解即可.如果担心牛奶里面有小颗粒没有溶解,可以用0.22um的膜过滤一下,防止有颗粒在膜上形成斑点的背景.

鬱伦顾15530905038:    bsa和血清哪个封闭山羊抗体好 -
赵炎发:      : 要看你山羊抗体的交叉反应效果.BSA的效果. 一般用BSA.

鬱伦顾15530905038:    Western blot 中脱脂奶粉封闭的是哪些蛋白?原理是什么? -
赵炎发:      : 脱脂奶粉中主要是乳清蛋白和酪蛋白.原理就是用非抗原的蛋白去封闭膜,避免标记抗体固定在膜上引起背景增高.


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(编辑:qq网友)
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