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5bsa封闭液配制

来源:www.zuowenzhai.com   投稿:2024-05-30

5% bsa封闭液怎么配
答:如何配制5% BSA封闭液?取1g BSA,加入蒸馏水,定容到100ml即可。常见的稀释液有哪些?常见的稀释液包括5%脱脂奶粉或5% BSA溶液。最常用的封闭剂是0.05%-0.5%的BSA,封闭是否必要,取决于ELISA的模式及具体的实验条件。双抗体夹心法中,只要酶标记物是高活性的,操作时洗涤彻底,不经封闭也可得到满...

western牛奶封闭液怎么配
答:推荐用TBST进行稀释获得5%的牛奶封闭液(5g/100mL)。拓展:一、牛血清白蛋白(BSA),又称第五组分,是牛血清中的一种白蛋白,包含583个氨基酸残基,分子量为66.430 kDa,等电点为4.7。牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用,例如在western blot中作为Blocking agent;在酶切反应缓冲液中加入BSA,通...

脱脂奶粉封闭液怎么配
答:2) 封闭液浓度:封闭时一般用5%脱脂牛奶,也可用1-5%BSA或1%无蛋白封闭液;配制二抗稀释液一般为1-5%脱脂牛奶,全部用PBS稀释 3) 封闭时间:室温1-2h、4度过夜或37度半小时 4) 封闭液pH:一般5%脱脂牛奶pH大约为6.0-6.5左右,而1%脱脂牛奶可能6.5-7,好像RD公司的WB-Protocol中要求封闭液和...

骨组织免疫组化实验步骤(HRP-DAB法)
答:4. 封闭 5%BSA封闭液 37℃ 30min, 甩干不洗。 5. 孵育一抗 TBS或PBS稀释一抗。4℃湿盒过夜。6. 孵育二抗 TBS 5min×5。 3%H 2 O 2 滴加于切片上,室温避光10min。 滴加聚合HRP标记二抗,37℃,30min。 TBS 5min×5。 7. DAB显色 依照DAB...

体积分数为0.5%的牛血清白蛋白(BSA)如何配制?用水配还是用别的溶剂呢...
答:你是干什么用?如果是做ELISA之类免疫学实验,用PBS就可以了,0。5%就是称0。5克BSA然后溶在100mlPBS里面。

荧光原位杂交会用到哪些试剂?
答:(8)DAPI/antifade溶液:用去离子水配制1mL/mg DAPI储存液,按体积比1:300,以antifade溶液稀释成工作液。(9)封闭液I:体积分数5% BSA 3 mL,20×SSC 1 mL,ddH2O 1mL,Tween20 5 μL混合。(10)封闭液II:体积分数5% BSA 3mL,20×SSC 1mL,goat serum 250 μL,ddH2O 750 μL,...

western blot试验中遇到的问题,希望能帮到正在苦恼的你~
答:PVDF膜先置于甲醇中处理10 s,然后浸于电转缓冲液中10 min,再夹三明治。NC膜则不需要预处理。我们用的是5%脱脂奶粉,10%TBS缓冲液配制。正常情况,室温封闭1h即可。如果曝光背景过高,可以适当延长封闭时间至2-5h,也可以4℃过夜, 封闭时间过长并不会导致检测信号减弱 。如果延长了封闭时间,...

荧光原位杂交会用到哪些试剂?
答:- 方法:用去离子水配制1mg/mL DAPI储存液,按体积比1:300,以antifade溶液稀释成工作液。9. 封闭液I:- 成分:体积分数5% BSA 3mL,20×SSC 1mL,ddH2O 1mL,Tween20 5μL混合。10. 封闭液II:- 成分:体积分数5% BSA 3mL,20×SSC 1mL,山羊血清250μL,ddH2O 750μL,Tween20 5μL...

BSA有结合水吗
答:没有结合水。BSA主要是封闭液中用到,其实作用显而易见是起到封闭效果,就是结合包被过程中未结合的结合位点,提高ELISA中的特异性结合,提高实验的精确度,BSA封闭液配制方法说明BSA封闭液是由牛血清白蛋白配制而成,在酶切反应缓冲液中加入BSA,通过提高溶液中蛋白质的浓度,对酶起保护作用。

基质胶变性后还能用于细胞贴壁吗
答:3.通透:加0.3%-0.5%Triton X-100(用1X的PBS稀释配制),室温通透20-30min(如果是检测细胞膜上表达的抗原,则省略此步骤)。PBS清洗3次,3-5min/次。吸干PBS。4.封闭:在玻底培养皿中滴加正常血清或5%BSA封闭液,室温封闭30-60min;5.孵育一抗:吸掉封闭液,不用PBS洗,在每个玻底培养皿...

巴琼克19453646636:    5%的BSA怎么配?5%的BSA怎么配
贲可澜:      : 高级商务秘书与行政助理:BSA(Business Secretary & Administration)摩根BSA(Business Secretary & Administration)证书是由全球摩根商务顾问依据摩根标准(...

巴琼克19453646636:    求封闭液中1%的BSA是怎么配制?? -
贲可澜:      : 取1g BSA,加蒸馏水,定容到100ml就行了. 最常用的封闭剂是0.05%-0.5%的BSA,封闭是否必要,取决于ELISA的模式及具体的实验条件.并非所有的ELISA 固相均需封闭,封闭不当反而会使阴性本底增高. 一般说来,双抗体夹心法,只要...

巴琼克19453646636:    ELISA实验的封闭剂(5%脱脂奶粉)为什么要用PBS配制?用去离子水配的话会有什么影响? -
贲可澜:      : 蛋白要在一定的盐离子条件下才稳定,如果你直接用去离子水配封闭液,包被的蛋白可能会有影响.如果觉得用PBS麻烦,可以用生理盐水.

巴琼克19453646636:    BSA蛋白含量一般是多少? -
贲可澜:      : 这个问题不具体,很难回答啊.BSA本身就是一种蛋白,它的浓度就是它的含量. 如果假设你这个问题是这么问的: 1. 抗体中,一般BSA蛋白的含量是多少?为了保护蛋白,通常会加入0.1%-1%,或者2mg/ml-15mg/ml的BSA作为保护蛋白,防止抗体降解 2. 进行WB或其他免疫实验室,封闭液中BSA的含量是多少?通常1-5%的BSA会用于制备封闭液 3. 蛋白定量时,标准品BSA的含量是多少?因为BSA要用于制作标准曲线,因此根据样品浓度,设置浓度梯度配溶液就好了.

巴琼克19453646636:    酶标板包被 -
贲可澜:      : 1)聚苯乙烯材料能吸附蛋白质. 2)选择什么包被取决于你要检测什么,是抗原还是抗体.我们一般用HIV HCV 人IgG 包被来检测HIV HCV的病毒抗原.用HBsAg包被,来检测抗HBsAg抗体. 3)CB是碳酸盐缓冲液吧,在pH9.6的碳酸盐缓冲液...

巴琼克19453646636:    elisa封闭液用的BSA要纯度很高吗 -
贲可澜:      : 这个最好用纯度高的.所谓封闭液的作用就是封闭掉任何有非特异性蛋白的结合位点.其实BSA并不是最佳的封闭选择,非特异性的IgG,或者Fc端判断才是,可以封闭掉非特异性的Fc结合位点,减少假阳性.但是考虑到价格的因素,高纯度的BSA已经比非特异抗体便宜了. 当然,你的实验如果要求不高,用低纯度的,也能得到结果的.

巴琼克19453646636:    ELISA实验中的封闭液(5%的脱脂乳)用PBS配的还是PBST?这两者有区别吗? -
贲可澜:      : 有区别,一般用PBS,PBST中的吐温有洗涤的效果.

巴琼克19453646636:    免疫组化基础知识 -
贲可澜:      : (一)、仪器设备 1)18cm不锈钢高压锅或电炉或医用微波炉;2)水浴锅 (二)、试剂 1)PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L,KH2PO4 1.4mmol/L. 2)0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液(CB,pH6.0,1000ml):柠...

巴琼克19453646636:    关于western二抗的选择及不能用脱脂奶粉封闭时用什么封闭液? -
贲可澜:      : 对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体,这一点是非常重要的.比如,如果一抗是兔来源的抗体,二抗一定要用抗兔的二抗来匹配;或一抗是小鼠的IgM一抗,二抗必须是山羊/兔抗小鼠的IgM(不是IgG)二抗.用5%脱脂奶粉或3%BSA(含 0.1%Tween20 TBS或PBS配制)都可以封闭吧,这个得看你的试验需要呢


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