细胞爬片如何制作?
：答：细胞爬片就是在圆形玻璃盖玻片上铺展细胞，把盖玻片用无水乙醇脱脂，放置到12或24孔板里（按照盖玻片大小决定），紫外杀菌，多聚赖氨酸处理（帮助细胞贴壁），PBS清洗，然后正常传细胞就可以了。

储存液0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide这...
：答：这个是说抗体在冻干前的溶解，冻干后，只有水蒸发了，但象BSA， 叠氮钠，PBS还是存在于抗体干粉中的。你可以直接用水，比如抗体规格是0.1ml，你就用0.1ml水溶解，如果是1ml规格的，就加入1ml水。当然，你可以用50%甘油水溶液来溶解。但抗体稀释时，还得用PBS之类的，而不可以用水。

wb实验的原理和步骤
：答：1.培养细胞或药物处理。 2.弃培养基,用1X PBS漂洗细胞2次,去尽残留培养基。 3.加入1X SDS样品缓冲液,刮落细胞,转移到Ep管。注意:冰上操作。 4.超声10~15秒剪切DNA以减低样品粘性。 5.煮沸样品5min。 6.离心12000g,5min,取上清。 SDS-PAGE电泳 一、清洗玻璃板 二、灌胶与上样 1. 玻璃板对齐后放入...

做吖啶酯的化学发光项目,实验时用什么样的缓冲剂比较好呢,有推荐的吗...
：答：在开展吖啶酯的化学发光实验时，选择合适的缓冲剂至关重要。以下是几种推荐的缓冲剂：1. 磷酸盐缓冲液（PBS）：这是一种常用的缓冲液，适用于维持反应环境的pH值，特别是在蛋白或抗体的捕获过程中。2. 牛血清白蛋白（BSA）：在酶切反应缓冲液中加入BSA，可以增加溶液中蛋白质的浓度，从而保护酶免受...

有关HRP标记问题
：答：能显色，说明你的HRP标记BSA成功了。用BSA封了的孔也显色（理论上不显色），最大的可能是你的稀释度不够，ELISA灵敏度很高的，你如果标得好的话，应该是要稀释一万到十万倍，这样阴性值才会不高。你用BSA封闭没什么意思，可以换一种，比如明胶，酪蛋白等。将HRP标记BSA稀释成一定的梯度。

细胞因子分装时应加入多少含有0.1%的bsa
：答：细胞因子购买到的产品形式一般为冻干粉，请参考说明书了解其原来的制剂形式。并用厂家推荐的方式进行复溶，而后用厂家的制剂形式（例如PBS）进行0.2%（或者更高浓度）和0.1%的制备；最终保证分装前细胞因子溶液中的BSA含量为0.1%。分装操作请务必注意无菌操作。

荧光素梅活性检测 一般值是多少
：答：纯化的萤火虫和Renilla荧光素酶连续地用含1mg/ml BSA的1×PLB稀释,配有计算机的Turner Designs荧光照度仪用来检测10秒钟的总荧光,在最初2秒的预读延迟后。直接检测高浓度的两种荧光素酶的发光反应时,在荧光照度仪的样品室中加入中性密度滤光片。在含10fg和100fg的Renilla荧光素酶反应中测试发光,需减去来自海洋腔...

PBS缓冲液洗5分钟*3,是浸泡还是冲洗?
：答：你说的抗体我没用过，我做过的免疫组化是用的拟南芥和贯叶连翘的愈伤组织，自身激发荧光很强,一抗是58K和Pin1，浓度都是1：250稀释的，二抗是FITC和Cy3，1：50和1:250.一抗4度过夜,二抗2小时.我做的是双标,二抗后先BSA洗1遍,再PBS 3遍.背景每次都还好,对照组的背景也不强....

请教western blot孵一抗
：答：Tween-20是一种去污剂，可以降低非特异结合带来的背景。你上面提到的TBS+0.1% Tween-20+5%脱脂奶粉，其中的TBS完全可以被PBS代替。脱脂奶粉也可以用BSA代替，不过脱脂奶粉要便宜许多。不知道你说的“做了几次都没结果”是怎么样没结果，膜都是黑的，还是都是白的？这是两种完全不同的“没结果”。

酶标板的蛋白质吸附性怎么测是用ELISA吗
：答：5、加抗体标本(和二抗):注意该换枪头时换枪头。标本稀释一般可用pbs稀释，也可用封闭液去稀释。如需加二抗，还要注意二抗的工作浓度，太高浪费，太低则着色浅。6、显色:显色系统又很多，我们一开始做的时候，要选择适宜的显色系统。注意显色系统酶活性底物的保存HRP结合物加硫柳泵，AP结合物可加...

戚废海17342117108：    稀释分装重组细胞因子用的BSA(0.1%)用什么液体配制?PBS还是Hanks液?细胞因子的稀释要求用去离子水. -
广冉嵇:      ：[答案] BSA其实直接用蒸馏水稀释即可.细胞培养时可用细胞培养的响应缓冲液稀释,对BSA影响都不大.

戚废海17342117108：    BSA稀释用什么配制 -
广冉嵇:      ：[答案] |||5%BSA均用1*PBS稀释,看看,用PBS,你再做一次.|||5%BSA均用1*PBS稀释,用PBS,你再做一次.|||用0.1mol/LTris-HCl配也行.|||用0.1mol/LTris-HCl配也行.

戚废海17342117108：    关于PBS缓冲液的配制? -
广冉嵇:      ： 0.2mol/L(pH7.4)磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer, PB)试剂: NaH2PO4?2H2ONa2HPO4?12H2O配制方法:配制时,常先配制0.2mol/L的 NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4,两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液(PB),根据需...

戚废海17342117108：    血清抗体干冻粉用何稀释啊(是去离子水,PBS,还是生理盐水啊 ) -
广冉嵇:      ： 你可以先加少量的水,比如100ul或者1ml的水溶解.溶解完后,稀释可以用PBS或者专门的抗体稀释液.

戚废海17342117108：    求助:细胞培养用PBS缓冲溶液如何配制? -
广冉嵇:      ： 建议你最好买现成的粉末,GIBCO或者SIGMA是最好的,当然也是最贵的.水用四蒸就可以了,配好之后直接高压灭菌后就可以用了,很方便.要是不放心加点抗生素也行.如果有条件的话也可以直接买液体的,不过需要的银子就更多了.三磷酸腺苷(站内联系TA)国产的粉末就可以 PBS这个东西太简单了,国产货不会有意外的chuyinghao(站内联系TA)自己配都行啊,今天我还看有人卖生工的20*的PBS呢gulili2008(站内联系TA)PBS溶液:NaCl 8.0g,KCl 0.2g,Na2HPO4

戚废海17342117108：    PBS缓冲液的配制请教各位PBS缓冲液这么配制?不甚感激
广冉嵇:      ： 含0.05%吐温-20的pH7.4的磷酸盐缓冲液(简称为PBS-T)配制方法为: 称取磷酸二氢钾(KH2PO4)0.2g,磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)2.9g,氯化钠(NaCl)8.0g,氯化钾(KCl)0.2g,吐温-20 0.5mL,加水至1000mL. PBS:Phosphate Buffered Saline PBS 1L配方pH7.4:磷酸二氢钾(KH2PO4)0.24g,磷酸氢二钠(Na2HPO4)1.44g,氯化钠(NaCl)8.0g,氯化钾(KCl)0.2g,加水至1000mL.

戚废海17342117108：    如何能将PBS配成均匀稳定的溶液 -
广冉嵇:      ： PBS溶液又称磷酸盐缓冲溶液,一般选择K2HPO4和KH2PO4配制,因为钠盐溶解的较慢.根据不同pH的溶液,称量不同质量的磷酸盐,也可以用pH计调溶液的pH.PBS一般用作支持电解质. 其配置方法如下:采用去离子水、KH2PO4和...

戚废海17342117108：    含双抗的PBS缓冲液配制方法,具体步骤 -
广冉嵇:      ： 你是指细胞培养用的双抗 是吧.这个用细胞培养用的PBS配制就行了. 以下是常用的配方.如果想省事,其实用生理盐水(0.9%氯化钠)就可以了.

戚废海17342117108：    求助)组织固定(甲醛,多聚甲醛,配制 -
广冉嵇:      ： 我们固定脑组织做免疫组化染色就是这么做的.但是在配置多聚甲醛的时候,由于多聚甲醛很难融解,以般需碱性条件,并附以温热融解.如果直接配成PB+多聚甲醛,比较难融解.我们是先用蒸馏水配置500ml8%多聚甲醛,融解后加入500ml 0.2 M PB.

戚废海17342117108：    PBS磷酸缓冲液的配制 -
广冉嵇:      ： 先分别配成两种标准液,使用的时候按照需要的PH值以不同比例混合就可以了,要精确的话混合好后要用精密PH计调PH.

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