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bsa封闭液

来源:www.zuowenzhai.com   投稿:2024-05-15

Elisa中的blocking buffer 、tween、BSA等问题
答:最常见的封闭剂是BSA、脱脂奶粉、酪蛋白、明胶和Tween-20(0.05 - 0.1%)稀溶液。一抗的稀释看你试验的要求了。二抗你说的是酶标抗体吧,这个要稀释到工作浓度,后面的显色效果才是最佳的!BSA主要是封闭液中用到,其实作用显而易见是起到封闭效果,就是结合包被过程中未结合的结合位点,提高ELISA...

bsa的性质与作用是什么?
答:二、作用:1、在酶切反应缓冲液中加入BSA,通过提高溶液中蛋白质的浓度,对酶起保护作用。防止酶的分解和非特异性吸附,能减轻有些酶的变性,减轻不利环境因素如加热,表面张力及化学因素引起的变性的。2、ELISA中也常常用到,比如封闭液,样本稀释液,酶结合物稀释液都可以用BSA。3、生化研究,遗传...

elisa blocking buffer 到底是5%的bsa还是0.5%bsa
答:封闭液的浓度,与其他条件一样都需要摸索,在不同的ELISA中是不一样的,可以做几个浓度的作对比,选取合适的浓度。我现在用的封闭液也是BSA,一般是1%,2%,具体不同实验还是需要去摸索的。

细胞培养时bsa与fbs有什么不同?
答:\x0d\x0a牛血清白蛋白(BSA)用途:\x0d\x0a1、 在酶切反应缓冲液中加入BSA,通过提高溶液中蛋白质的浓度,对酶起保护作用。防止酶的分解和非特异性吸附,能减轻有些酶的变性,减轻不利环境因素如加热,表面张力及化学因素引起的变性的。\x0d\x0a2 、ELISA中也常常用到,比如封闭液,样本...

蔗糖可以做封闭液吗
答:1、ELISA实验中,蔗糖本身没有封闭作用;2、封闭液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等。3、加蔗糖的主要目的是保护ELISA板子吸附(包被)的蛋白,起到“保护剂”的作用。4、蔗糖溶液一般在ELISA板子经过BSA封闭后加,当然也有将蔗糖加到封闭液中同时进行处理;那一种更好需要你实验后来验证。但多数选择...

BSA蛋白含量一般是多少?
答:这个问题不具体,很难回答啊。BSA本身就是一种蛋白,它的浓度就是它的含量。如果假设你这个问题是这么问的:抗体中,一般BSA蛋白的含量是多少?为了保护蛋白,通常会加入0.1%-1%,或者2mg/ml-15mg/ml的BSA作为保护蛋白,防止抗体降解 进行WB或其他免疫实验室,封闭液中BSA的含量是多少?通常1-5%的...

ELISA试验包被抗原中加入BSA对包被有影响吗
答:重配吧,这个肯定有影响的,不可以用的.包被抗原中的抗原量很少,相对于BSA来说是微量的.这样板子上吸附的都是BSA,而抗原吸附的很少或者没有.后期实验肯定失败.除非你BSA加入特别少(不小心滴了一点点进去),相对于抗原来说都少.这样影响就会少一些....

BSA封闭液能用胎牛血清替代吗?效果怎么样?求解
答:牛血清蛋白等级 从低到高 :牛血清白蛋白,牛血清白蛋白第五组分,牛血清白蛋白(无必须脂肪酸),牛血清白蛋白(无蛋白酶),牛血清白蛋白(细胞培养级),金标级牛血清白蛋白,交联牛血清白蛋白 就是说 越往后的 蛋白 品质越高,当然价钱也越贵。你说的牛血清蛋白(BSA)中的BSA 就是“牛血清...

免疫荧光双标两种一抗可以一起加吗
答:▷用PBST配置1%的BSA封闭液,将切片在封闭液中孵育1h ▷4℃冰箱,一抗过夜 ▷用枪吸走一抗液体,PBS溶液洗3次,每次5min ▷二抗室温1h ▷用枪吸走二抗液体,PBS溶液洗3次,每次5min(避光条件下进行)6)第二荧光标记 ▷4℃冰箱,一抗过夜 ▷用枪吸走...

血清抗体干冻粉用何稀释啊(是去离子水,PBS,还是生理盐水啊 )
答:你可以先加少量的水,比如100ul或者1ml的水溶解。溶解完后,稀释可以用PBS或者专门的抗体稀释液。

鲁毓眨19725343890:    求封闭液中1%的BSA是怎么配制?? -
裴固俗:      : 取1g BSA,加蒸馏水,定容到100ml就行了. 最常用的封闭剂是0.05%-0.5%的BSA,封闭是否必要,取决于ELISA的模式及具体的实验条件.并非所有的ELISA 固相均需封闭,封闭不当反而会使阴性本底增高. 一般说来,双抗体夹心法,只要...

鲁毓眨19725343890:    elisa封闭液用的BSA要纯度很高吗 -
裴固俗:      : 这个最好用纯度高的.所谓封闭液的作用就是封闭掉任何有非特异性蛋白的结合位点.其实BSA并不是最佳的封闭选择,非特异性的IgG,或者Fc端判断才是,可以封闭掉非特异性的Fc结合位点,减少假阳性.但是考虑到价格的因素,高纯度的BSA已经比非特异抗体便宜了. 当然,你的实验如果要求不高,用低纯度的,也能得到结果的.

鲁毓眨19725343890:    5%的BSA怎么配?5%的BSA怎么配
裴固俗:      : 高级商务秘书与行政助理:BSA(Business Secretary & Administration)摩根BSA(Business Secretary & Administration)证书是由全球摩根商务顾问依据摩根标准(...

鲁毓眨19725343890:    ELISA实验,1%BSA封闭液和稀释液用水溶和pbs溶一般有区别吗 -
裴固俗:      : 封闭不当反而会使阴性本底增高,操作时洗涤彻底,取决于 ELISA 的模式及具体的实验条件,业已起到了类似封闭剂的作用.5%的牛血清白蛋白,封闭一般是不可少的(见2,而且封闭后的载体不易长期保存,吸收后固相载体表面尚有未被占据...

鲁毓眨19725343890:    elisa blocking buffer 到底是5%的bsa还是0.5%bsa -
裴固俗:      : 封闭液的浓度,与其他条件一样都需要摸索,在不同的ELISA中是不一样的,可以做几个浓度的作对比,选取合适的浓度.我现在用的封闭液也是BSA,一般是1%,2%,具体不同实验还是需要去摸索的.

鲁毓眨19725343890:    蔗糖可以做封闭液吗 -
裴固俗:      : 1、ELISA实验中,蔗糖本身没有封闭作用;2、封闭液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等.3、加蔗糖的主要目的是保护ELISA板子吸附(包被)的蛋白,起到“保护剂”的作用.4、蔗糖溶液一般在ELISA板子经过BSA封闭后加,当然也有将蔗糖加到封闭液中同时进行处理;那一种更好需要你实验后来验证.但多数选择前者.

鲁毓眨19725343890:    免疫荧光用什么封闭比较好 -
裴固俗:      : BSA可以用来封闭,网上查到的浓度0.5%到2%都有,1%比较常见. 孵育一抗之前要加,封闭孵育时间过后,加一抗之前不要洗掉,只移除多余液体即可.之后不需要再封闭,但是一抗和二抗都应该用含有BSA的缓冲液来稀释.有些人还加tween来减少非特异性结合. 封闭抗原也可以使用二抗抗体所属动物种类的血清.没有统一固定的浓度要看情况. 用试剂盒则有自带的封闭试剂,效果更稳定有保障. 免疫染色实验一个重要特点就是最佳条件都是试出来的,每换一个抗体条件都可能需要调整.所以最好的办法是用生产商测试过的实验方法.写个邮件问一下,就这么简单.

鲁毓眨19725343890:    生物学分子杂交中加入的封闭液为什么不会把膜上的探针也给封起来? -
裴固俗:      : 核酸杂交(southern或者northern)中常会用到鲑鱼精等DNA物质作为封闭液,和蛋白中的western、ELISA的原理类似,但绝对不是一回事,更不会像一楼所说的那样用BSA去做核酸杂交.封闭液所封闭的是膜或者说是背景,而不是靶标核酸分子,也就无所谓特异性封闭和非特异性封闭这个概念.封闭的目的是防止背景过深或者发生非特异性显色.至于封闭液会不会把能与探针结合的位点封闭起来?我个人认为,可能有极微量的位点会被阻隔,但不影响最终结果.

鲁毓眨19725343890:    用于封片的bsa溶液需要灭菌吗 -
裴固俗:      : 用于封片的bsa溶液需要灭菌 只是有缓冲作用,不是缓冲液,缓冲液是强碱弱酸盐-弱酸或强酸弱碱盐-弱碱构成的溶液体系,硼砂是四硼酸钠,属于强碱弱酸盐,只有对酸的缓冲作用,对碱的缓冲作用很弱.计算PH值的话,需要知道四硼酸的电离常数Ka,设其为二元酸,则硼砂溶液PH值为7+0.5lg(c/Ka),c为溶液浓度,该式适用于不是特别稀的溶液.


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