pbs重悬细胞能在4度放多久
EMSA实验流程
：答：1.3加入150ulNucBusterReagent1/50ul细胞体积（按照细胞体积进行试剂比例调整），重悬细胞（1.5ml离心管）。1.4震荡混匀15秒，冰上静置5分钟（重复两次）。1.5进行4度16000g离心后去上清（上清为细胞质组分）。1.6（可选细胞质清洗步骤）加入500ul预冷PBS缓冲液重悬、离心、去上清。1.7每50ul细胞...
冻存细胞,放到4度一段时间后细胞发生沉淀,这是正常的吗?会不会影响细胞...
：答：你好！这当然是正常的。因为细胞本身有重量，在重力作用下都会进行沉降，这在冻存的时候是不会对细胞产生影响的。细胞冻存一般是：4℃30min，-20℃30min，-80℃过夜，之后放于液氮保存。要注意冻存细胞的配比，中间应加入DMSO防冻剂，注意配比，同时加入胎牛血清（不同细胞比例不同）。
细胞能在PBS中存活多久
：答：细胞能在PBS中存活多久 我曾经把白细胞放在PBS中4度过夜，转天涂片在镜下观察，细胞形态完好
配置好的细胞冻存液4度冰箱能放多久
：答：一般在24小时内用掉吧。实际上我们都是新鲜配制的，因为里面有血清，时间长有些东西会失活的。
新鲜组织在四度冰箱能放多久
：答：新鲜组织可保存72小时且仍然保持细胞活性及组织内不同细胞的组成，新鲜组织冰冻切片固定后保存在pbs中,放在4度冰箱里， 这个只能是短期保存。
细胞4度放了2小时还能铺板吗
：答：细胞在4℃放置时，细胞的新陈代谢处于相对静止的状态，细胞不会死亡，但也不会分裂或生长。因此，细胞在4℃放置2小时后，其状态不会发生太大变化，仍然可以用于实验操作。在进行铺板时，需要将细胞从4℃取出并转移到室温下进行操作。由于细胞已经处于相对静止的状态，因此铺板时细胞的分布和生长情况与正常...
做膀胱癌脱落细胞FISH,怎样处理收集到的尿液标本?
：答：以无菌中段尿的标准用无菌离心管收集，若不能很快实验，可短暂保存在 4度冰箱内，最好不要超过一个小时！收集后快速离心，超净台下培养液重悬尿沉渣，接种培养瓶即可！如果你不需要培养，而仅仅是拿细胞直接做，就直接做细胞 涂片了，当然有甩片机更好了！做涂片离心后可用PBS重悬洗两到三遍，再...
细胞冻存没放在4度太久
：答：细胞冻存没放在4度太久没事。细胞冻存用的DMSO很毒但是在4度，对细胞的毒性大大降低细胞代谢也很缓慢，放4度是一个平衡的过程。细胞在4度的时候对它本身没有很大的影响，冻存时有这个温度是因为细胞内有水分。
求助:贴壁细胞的冻存和复苏的具体步骤
：答：2）不同细胞消化时间有差异，以实际镜检结果为准，大部分细胞回缩变圆并有少量细胞脱落即可中止消化，消化时间不宜过长；3）应选择汇合度80%-90%左右，细胞处于对数生长期时进行冻存操作，确保细胞冻存时状态最佳，冻存密度可根据细胞特性进行调整；4）冻存细胞保存温度应低于-130℃，不可在-80℃长期...
配置好的PIPES缓冲液于4°放置多久还能用来做感受态细胞
：答：3．于4℃用SorvallGS2转头（或与其离心管相配的转头）以4000r/min离心10min，以回收细胞。4．倒数培养液，将管倒置1min以使最后残留的痕量培养液流尽。 5．以10ml用冰预冷的0.1mMCaCl2重悬每份沉淀，放于冰上。6．于4℃用SorvallGS3转头（或与其相应的转头）以4000r/min离心10min，以回收细胞...
熊疮空: ： 如果没开封,可以放很久,1年应该没问题,如果开封了,在用的时候注意无菌操作一般都不会存在污染问题,可以用很久~~如果没有无菌操作的话,就不好说了啊;我自己配的PBS,没有高压,只用于做流式时洗细胞,因为配好了就分250ml~500ml装放4度冰箱,每次用只拿一瓶,用完再开另一瓶.一般用2个月都没事.如果要养细胞的话,注意下分装,还有用的时候要无菌,一般都没问题的.
邹达审19489835385： PBS 为什么要现配现用,昨天配的还能用吗,一直在4度冰箱里 -
熊疮空: ： 当然可以用.不知道你是从哪儿看的,PBS只要滤过菌能保存近一年呢.PBS主要还是为了提供缓冲介质,象磷酸氢二钠和磷酸二氢钠能保证PH在7.2~7.4,时间长了PH发生变化就起不到太大的作用了.
邹达审19489835385： 做膀胱癌脱落细胞FISH,怎样处理收集到的尿液标本? -
熊疮空: ： 博凌科为解答:曾做过尿液细胞培养,以收集患者晨起第一次尿,因为经过一夜尿液浓缩,有形成分最多!以无菌中段尿的标准用无菌离心管收集,若不能很快实验,可短暂保存在 4度冰箱内,最好不要超过一个小时!收集后快速离心,超净台下培养液重悬尿沉渣,接种培养瓶即可!如果你不需要培养,而仅仅是拿细胞直接做,就直接做细胞 涂片了,当然有甩片机更好了!做涂片离心后可用PBS重悬洗两到三遍,再细胞涂片!尿液量大于300ml,请先离心最后剩下50-100ml并加入等量 100%酒精,最后浓度为50%放置4度崩相中,可保存一周.
邹达审19489835385： 细胞可不可以固定后放置一段时间再做免疫荧光 -
熊疮空: ： 这个没有绝对的.取决于你的试验方法和目的.一般来说,固定后,把样本再转移到保存液中,可以大大延长保存的时间. 为了保护抗原表位,建议你使用新鲜配置的多聚甲醛来固定.固定后立刻转移到5%BSA的PBS溶液中(最好放防腐剂),可以在4度保存一段时间. 当然,样本长时间保存,肯定对结果会有不好影响.至于影响的大小,你要做一个时间曲线来证明.以后就心中有数了.
邹达审19489835385： 磷酸缓冲液在4度环境下能保存多久啊就是PBS和PB能保存多久 -
熊疮空: ：[答案] 两个月,密闭保存.
邹达审19489835385： 使用PBS配制的过氧化氢酶溶液可以在 - 20℃保存吗? -
熊疮空: ： -20肯定没问题,这个温度可以长期存放蛋白质,用酶的时候最好放在冰盒里4度也行,但是要蛋白比较稳定,而且时间最好不要太长
邹达审19489835385： A549细胞在pbs中可以存活多久 -
熊疮空: ： A549细胞在pbs中可以存活多久 细胞用pbs洗过之后没有了只能重新培养了 在细胞培养的时候,用PBS冲洗细胞的操作需要尽量避免细胞的损失 对于贴壁很好的细胞,可以顺着壁稍微快点加,让PBS顺畅的流经所有细胞后晃动培养瓶后吸走PBS.但是对于贴壁比较弱的细胞就得顺着壁慢点加,然后慢慢的晃动培养瓶,轻轻倾斜培养瓶,保持吸管在液面表面慢慢的吸走PBS 对于悬浮细胞,直接用PBS重悬后离心,要想细胞减少损失的话,可以稍微提高离心力
邹达审19489835385： 细胞悬液放四度冰箱四小时还能活吗 -
熊疮空: ： 普通冰箱估计活不了了、正常5度但是运转到0度左右压缩机停止工作、高于5度开始运转、你说到了0度了那不冻死了、、、、、
邹达审19489835385： 将细胞收集后用95%的酒精固定后存在4度,以后可以用来作PCR或者WB吗? -
熊疮空: ：[答案] 用酒精的的话,不是用来固定的,是脱水用的,脱水后是要放100%的乙醇中冻与-20度的.固定式用4%的多聚甲醛4度过夜.你想保存细胞的话收集后离心,用PBS洗一次,去血清,再离心,去上清,将沉淀保存液氮中,或是直接冻到-80度就可以了.
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