pbs一洗细胞就掉了
细胞消化成团怎么回事?细胞还没用胰酶消化,用PBS洗时,就有大量的细胞脱...
：答：细胞消化成团个人认为是和消化酶有关，消化酶是否保存不当（主要为温度）并且时间过长失去了消化活性（可以做酶活测定），或者酶的浓度配的不合适，在允许范围（防止消化过度损伤细胞）内适当加大酶液量。以上是某f发表的一些浅见解。关于第二个有大量细胞脱落，我想是没有做好及时的细胞传代，细胞汇合8...
空斑实验为什么PBS洗细胞会脱落?MA104细胞,孔板中培养需注意些什么...
：答：这个细胞贴壁不牢呗 洗的时候轻缓点
pbs对细胞有影响吗
：答：细胞在pbs中短时间没问题，但是，pbs没有细胞需要的营养，生长素，长时间就会死掉。时间长短应细胞种类而异，段的几十分钟，长的几个小时。
细胞用pbs孵育2小时会脱落吗
：答：有脱落的情况。不要将细胞在PBS中放太长时间。放时间长了会因为细胞缺少营养而导致细胞脱落。
如何更好的养细胞?
：答：b）对于难消化的细胞，我倒是建议用无钙镁PBS洗涤一次后，加入稍微多一点trypsin置37度彻底消化至脱落（一晃细胞就掉下来的那种），然后再加培养基终止、离心。这么做的道理是，细胞消化不彻底，势必会增加吹打辅助脱落的次数。而吹打次数越多，细胞活性越差。值得注意的是，有些特殊的细胞，不可以使用...
pbs洗涤血红细胞目的
：答：去除杂蛋白。洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白，以利于后续步骤的分离和纯化。洗涤红细胞，是为了安全合理用血和减少输血中的不良反应，将红细胞悬液用生理盐水反复冲洗获得的。
用酶消化细胞之前为什么要用pbs液清洗培养物而终止消化又是用完全培养...
：答：用PBS清洗掉培养液中残留血清，以免中和胰酶，致使细胞难以消化，终止消化用完全培养液也是因为完全培养液中含有血清，血清中有抑制胰蛋白酶的成伤·
流式胞内染色为什么不可以用pbs洗涤
：答：原因是影响流式细胞仪的准确检测。PBS中含有离子，如钙离子、镁离子等，这些离子会与细胞膜上的磷脂结合，导致细胞膜变性、断裂，从而使得胞内的细胞器等结构暴露在外，影响流式细胞仪的准确检测。
pbs缓冲液ph高会使细胞漂起来
：答：pbs缓冲液ph高会使细胞漂起来 PBS的PH值为7.2或7.4对细胞没有多大的影响，PBS是一种缓冲液，用来清洁细胞的，细胞还是有一定耐受力的，PH差异0.2对细胞来说没问题，在细胞培养的过程当中，随着细胞对培养基的消耗，培养基的PH值也是有一定变化的，细胞也不会因此长不好，除非营养消耗的很厉害或PH...
12孔板pbs洗细胞可不可以晃
：答：不可以。晃动12孔板会使细胞受到较强的机械刺激和应力，可能导致细胞聚集、破碎、脱落或损伤等不良现象，从而影响实验结果甚至失去细胞。在12孔板中进行PBS洗涤细胞时，不建议使用晃动的方法。
宫言晴: ： 细胞消化成团个人认为是和消化酶有关,消化酶是否保存不当(主要为温度)并且时间过长失去了消化活性(可以做酶活测定),或者酶的浓度配的不合适,在允许范围(防止消化过度损伤细胞)内适当加大酶液量.以上是某f发表的一些浅见解.关于第二个有大量细胞脱落,我想是没有做好及时的细胞传代,细胞汇合80%(理想)就应该进行传代,因为在培养过程中,培养基积累了大量的细胞代谢产物,导致培养基的成分,PH值发生变化,继续培养下去是有害的:营养成分不足+代谢产物堆积导致贴壁细胞脱落死亡,因此即便你好没有进行传代前的消化作用,已经有部分死亡的细胞脱落下来了(LZ君应该是有定时做显微观察,染色鉴定死活) 仍旧是某F的浅见- -,望指教
房泡股15267039106： PBS冲洗对细胞有影响吗?我们在转染前为了去除残留的含血清的培养基,就用PBS冲洗两次. -
宫言晴: ： 非高手,但用lipofectamine 2000做过转染的冒个泡 用PBS轻柔地冲洗细胞对细胞生存力没什么影响,但会造成细胞损失.如果发现细胞损失量比较大,可以仅冲洗1次或者不冲洗(但是倒培养基要尽量倒得干净点). 至于突起为啥没了,那就不清楚了.该不会你们用的PBS有问题吧…… 转染的话按照说明书上操作的就行了.成功率还是很高的.
房泡股15267039106： pbs对细胞有影响吗 -
宫言晴: ： 细胞在pbs中短时间没问题,但是,pbs没有细胞需要的营养,生长素,长时间就会死掉.时间长短应细胞种类而异,段的几十分钟,长的几个小时.
房泡股15267039106： 细胞培养时用PBS冲洗细胞如何降低细胞损失 -
宫言晴: ： 贴壁不牢的细胞 用移液管温和地将液体打在侧壁上~降低PBS冲洗时间及冲洗次数~
房泡股15267039106： pbs怎样洗剂细胞 -
宫言晴: ： 贴壁细胞就吸掉上清,加PBS,轻轻晃几下,再吸出就可以.悬浮的一样,就多了离心的步骤
房泡股15267039106： 有关动物细胞的培养液换培养液的问题. -
宫言晴: ： 如果是贴壁细胞,那么直接吸走旧的培养基,再加入新的就行了.中间可选用PBS洗一次.如果细胞贴壁不紧,容易脱落(如HEK-293),则培养基注入要缓慢.紧密贴壁细胞(如Hela)则不需注意.如果是悬浮细胞,则换液和传代操作差不多,一般也就不说换液,直接说传代了.收集细胞悬液,800-1000rpm离心5分钟,弃上清,加入新培养基,根据密度铺板就行了.
房泡股15267039106： 请问一下用流式细胞仪检测细胞凋亡的试验中,为什么要用PBS洗涤两次呢?用PBS洗涤的原理是什么呢? -
宫言晴: ： PBS是一种缓冲液,他的渗透压与一般细胞的相同,在做细胞试验或者活体组织实验中,一般就把PBS当做水来用,各种冲洗的过程什么的都是用它.这样不会改变细胞形态~
房泡股15267039106： 细胞传代在培养瓶分布不均匀有什么好方法解决 -
宫言晴: ： 细胞传代在培养瓶分布不均匀有什么好方法解决 1.观察培养基是否正常,细胞状态如何,细胞密度如何,决定是否传代.观察时拧紧盖子. 2.加热PBS、versene、培养基,(提前做好) 瓶子不要倒着放,不要让液体接触到瓶塞. 3.打开超净台...
房泡股15267039106： pbs缓冲液混入培养基在胰酶消化后不小心用pbs吹洗细胞成单个悬浮液,然后没倒掉pbs就加入培养基培养,会产生严重后果吗? -
宫言晴: ：[答案] 要看你加了多少PBS洗液,多了的话最好重新传代一次,少一点应该没什么问题,因为PBS洗液只是缓解溶液PH值,再就是除杂质.如果实验结果不重要还可以看看会有什么变化,再和我交流一下.非常欢迎一起讨论.
房泡股15267039106： 细胞消化过度会对流式凋亡实验有影响吗 -
宫言晴: ： 细胞消化过度会对流式凋亡实验有影响 因为是诱导凋亡的实验,细胞加药处理后,贴壁细胞会因为活力丧失而脱壁漂浮,而这部分细胞正是你需要的,所以加药处理完后要收集全部培养上清,少量PBS洗瓶内剩下的细胞,洗的PBS与之前收集的上清合并.胰酶消化.消化完毕用之前收集的培养基中止消化.离心后PBS再洗一遍.离心,弃上清,细胞沉淀中加入70% 4度预冷的乙醇(PBS配制),4度放置不少于1小时(有的文献说是不少于15分钟).之后离心去乙醇,PBS洗一遍后加入PI和DNAse,终浓度50 ug/ml,混匀,避光室温放置30 min后即可上流式细胞仪测定.
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