盐析纯化血浆中的免疫球蛋白为什么要用磷酸缓冲液

1，容易配制，经济方便；
2，受温度影响小，缓冲能力强；
3，对大部分蛋白和酶的结构及活性没影响，便于后续实验。
需要指出的是，不是所有的酶都适用于磷酸缓冲液，如某些以磷酸根为底物的酶。

是有区别的，磷酸缓冲液是鉴于PO43-,HPO42-,H2PO4-之间的缓冲能力而有其中的任意两种组成的缓冲液，而磷酸盐缓冲液是指由氯化钠，氯化钾，磷酸二氢钾，磷酸氢二纳而配成的溶液。

15746195394：盐析纯化血浆中的免疫球蛋白为什么要用磷酸缓冲液
郁屈适 ：答：缓冲液的作用是稳定特定的pH范围，故我的理解是，当盐析血浆重的蛋白质时，由于蛋白成分复杂，很容易在广域的pH范围下析出多种蛋白，当保持特定的pH值或者保持在一个相对比较狭窄的阈值内，能使某些特定的蛋白析出，而不需要的不析出，达到纯化的目的 ...

15746195394：分离纯化免疫球蛋白为什么尽可在低温条件下进行?所用溶液为何要先冷却...
郁屈适 ：答：常温下蛋白易降解，低温可以保持其活性;抗体对温度比较敏感，长时间暴露在室温下可以使抗体失活，因此提取免疫球蛋白最好在低温下进行。(摘自网络)溶液提前冷却也是为了保持低温环境，否则降温过程中抗体也可能因为温度高而失活。

15746195394：为什么要水解免疫球蛋白
郁屈适 ：答：从基础研究角度，水解免疫球蛋白可获得片段，有利于对免疫球蛋白各部分活性的进行研究。从药物制备角度，免疫球蛋白有副作用，主要跟其C区的免疫原性有关。通过水解，去除免疫球蛋白的C区，可以减轻副作用。

15746195394：免疫球蛋白生产过程中为什么要加进去除和灭活病毒的工艺
郁屈适 ：答：对献血员筛选可降低原料血浆的病毒含量，是保证血液制品安全性的一个重要手段。筛查能够保证病毒负载量最小，但是它不足以完全保证避免病毒感染。这是因为各种检测方法都有不足，它们不能检测出低于一定水平的病毒感染；感染病毒后至能够检测出抗体及抗原仍存在一个“窗口期”；且筛查过程中可能发生操作错误...

15746195394：免疫球蛋白提取实验注意事项及原因
郁屈适 ：答：⑶ 免疫电泳鉴定：（操作见第三章免疫电泳部分）。孔内加待测样品，电泳后，在槽内加抗IgG血清，琼脂扩散24h，观察结果。如果提取的IgG纯的话，则只出现一条弧形的沉淀线，且沉淀线位于γ—球蛋白区。此鉴定必须同时进行全血清及抗血清抗体的免疫电泳，以资比较。⑷ 圆盘电泳鉴定：用全血清样品及提纯...

15746195394：蛋白质的分级沉淀的原理
郁屈适 ：答：原理就是：溶液中的离子强度不同时,不同蛋白质的溶解度不同,步骤就是不断加硫酸铵以血浆为例：加到盐浓度20~30%时纤维蛋白原沉淀,再加到浓度50%时球蛋白沉淀,饱和时清蛋白沉淀基本原理硫酸铵沉淀法可用于从大量粗制剂中浓缩和部分纯化蛋白质.用此方法可以将主要的免疫球从样品中分离,是免疫球蛋白...

15746195394：五类免疫球蛋白分离纯化的方法有何不同?
郁屈适 ：答：离子交换层析法：利用不同的蛋白质在缓冲溶液中所带电荷不同，与某一载体上的具有相反电荷的离子基团进行吸附，然后进行解脱，达到纯化蛋白质目的。常用载体：纤维素DEAE，带正电，吸附带负电的Alb、α、β球蛋白。凝胶过滤法：凝胶颗粒是网状结构，当分子大小不同的混合物通过凝胶柱时，分子大的先下来，...

15746195394：纯化蛋白的原理是什么?
郁屈适 ：答：丙酮和丁醇等有机溶剂提取，它们有一定的亲水性和较强的亲脂性。是理想的提取液。冷乙醇分离法提取免疫球蛋白最早由Cohn于1949年提出，用于制备丙种球蛋白。冷乙醇法也是WHO规程和中国生物制品规程推荐的方法，不仅分辨率高、提纯效果好、可同时分离多种成分，而且有抑菌、清除和灭病毒的作用。

15746195394：免疫球蛋白生产过程中为什么要加进去除和灭活病毒的工艺
郁屈适 ：答：道理很简单，因为免疫球蛋白是要往人体里注射的，如果带有病毒，受者就会被感染！而且血液传染的病毒有像艾滋病毒，乙肝病毒，丙肝病毒这样可怕的病毒，绝对要杀灭！血液制品不仅要杀灭病毒，还要去除致热源。这样是对使用者的负责。不会导致被救者反而感染更严重甚至无法治疗的疾病。本人医学小硕士，还有...

15746195394：免疫球蛋白是怎么提取?
郁屈适 ：答：1、收集动物血浆：可以从动物如兔子、鼠等的血浆中获得大量的免疫球蛋白。2、细胞培养技术：通过将免疫细胞（如淋巴细胞）与特定的抗原刺激并体外培养，让其分泌免疫球蛋白。3、蛋白A或蛋白G亲和层析技术：这种方法利用免疫球蛋白与蛋白A或蛋白G之间的高度特异性反应，从血清或其他来源中纯化免疫球蛋白。4...