细胞换液用pbs洗要吹打吗

PC12细胞培养及应用
：答：将收集到的悬浮细胞、pbs清洗液中的细胞和消化下来的贴壁细胞以1000rpml离心5min，弃去上清，补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。冻存步骤配置细胞冻...

求助C2C12细胞分化成肌管,做细胞转染
：答：转染效率高，缓冲液非常有讲究，推荐QIAGEN的superfect转染试剂，沿细胞膜的电压差异会导致细胞膜的暂时穿孔、活体细胞。此法较易得到稳定转染。 电穿孔法。优点是转染效率特别高，但需要昂贵的电转仪，对不同的细胞可能会干扰细胞的代谢、钙离子浓度。血清的存在能显著提高转染效率。通过使用DMSO或甘油获得...

流式细胞术测细胞表面抗原步骤
：答：1. 定量细胞浓度 2. 分为2组，一组为实验组，另一组为抗体对照组 3. 两组都先加入非特异性的IgG，封闭可能的Fc受体 4. 按照抗体生产厂家的推荐浓度加入抗体，对照组加入同样荧光标记的非特异性同型抗体。5. 4°孵育半小时 6. 用含0.5% BSA的PBS洗2遍 7. 上机后先用抗体对照组设置阴性Gate...

发现操作不当立马给细胞pbs清洗污染概率大吗
：答：大，只是有可能影响以后的实验，如果要用胰酶消化的话，就可能会影响胰酶活性。细胞在pbs中短时间没问题，但是，pbs没有细胞需要的营养，生长素，长时间就会死掉。时间长短应细胞种类而异，段的几十分钟，长的几个小时。1、细胞在无血清培养基中易受某些机械因素和化学因素的影响，培养基的保存和应用不...

提取内皮祖细胞分离液分离后PBS洗两次转速多少
：答：冰上30min，PBS洗涤两次，500rpm，5min。PBS是磷酸缓冲液的简称，不仅伪狂犬病毒要用它稀释，一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释。PBS是一种缓冲液，他的渗透压与一般细胞的相同，在做细胞试验或者活体组织实验中，一般就把PBS当做水来用，各种冲洗的过程什么的都是用它，这样不会改变细胞形态。

如何把细胞中的杂质去除
：答：如果是贴壁细胞就比较好处理,只需要在换液的时候用PBS轻轻冲洗几次,细胞就会变得很清爽了

ES培养基成分
：答：弃去含有丝裂霉素C的培养基，加入2-3 mL PBS，轻轻摇动，弃去PBS，如此洗3-5次(必须洗3次以上，以便彻底洗去残存的丝裂霉素，丝裂霉素是有丝分裂抑制剂，因而对ES细胞有毒性);加入适量胰酶消化30秒，吸去消化液，静置至细胞层出现裂缝或明显滑壁为止，加入培养基，吹打，种至明胶处理过的培养皿中...

细胞培养传代时终止消化用什么试剂
：答：营养液中有血清，胰酶遇到血清就会自动终止消化，但这样操作对干细胞是有一定的影响的。对于容易消化的干细胞，加入pbs缓冲液洗去血清或加入胰酶，先中和血清的作用（30s），弃之，再加入适量胰酶作用10s-40s（根据细胞消化的难易程度），弃之，这样依赖残余的胰酶就可将干细胞消化单细胞。

测细胞凋亡,贴壁细胞dapi染色,还需要固定吗
：答：对于贴壁细胞或组织切片，加入少量 DAPI 染色液，覆盖住样品即可；对于悬浮细胞，至少加入待染色样品体积 3 倍的染色液，混匀。室温染色 5-10 分钟。吸除 DAPI 染色液，用 TBST、PBS 或生理盐水洗涤 2-3 次，每次 3-5 分钟。置于荧光显微镜下观察，激发波长 360-400nm。DAPI溶液注意事项：DAPI 被...

细胞培养液出现很多很小的颗粒,PBS能够冲
：答：PBS能够冲 PBS缓冲液PH值在7.2-7.4之间，是细胞最适合的PH值范围。且在酸碱微量的刺激下PH值基本不会发生变化。而培养细胞使用过的培养基PH值会发生变化，对细胞有伤害，细胞经过PBS缓冲液清洗会去除废弃的培养基，而保持细胞能在适合的PH值范围之内，良好生活。从而再换新的培养基使细胞继续增殖。